抑制酰基-辅酶A 去饱和酶1 表达对食管鳞癌细胞增殖和凋亡的影响及其分子机制探讨.pdfVIP

肿瘤2012 年9 月第32 卷第9 期　TUM OR Vol. 32, September 2012　　 681 DOI: 10.3781/j .issn.1000-7431.2012 .09.004 Copyright© 2012 by TUM OR Basic Research 基础研究 · 抑制酰基-辅酶A去饱和酶1表达对食管鳞癌细胞增殖和凋亡的影响 及其分子机制探讨 1 1 1 1 1 2 郜　辉 ，冯应勤，朱金峰 ，何兴端 ，鲁　培 ，刘红涛 1. 郑州大学第一附属医院肿瘤科，河南郑州　450052 ；2 . 郑州大学生物工程系，河南郑州　450001 [摘要]　目的：检测酰基 - 辅酶 A 去饱和酶 1 （stearoyl-CoA desaturase-1，SCD-1 ）在食管鳞癌组织和细胞中的 表达，分析其表达下调对食管鳞癌 EC1 细胞增殖和凋亡的影响，并探讨其相关的分子机制。方法：采用免疫组织 化学和原位杂交法检测 60 例食管鳞癌组织及其相应癌旁正常食管黏膜组织中 SCD-1 mRNA 和蛋白的表达，实时 荧光定量 PCR 和蛋白质印迹法检测正常食管组织 （作为阴性对照）和食管鳞癌细胞株中 SCD-1 mRNA 和蛋白的 表达。不同浓度 SCD-1 小干扰 RNA （small interfering RNA ，siRNA ）转染食管鳞癌 EC1 细胞后，采用实时荧 光定量 PCR 和蛋白质印迹法检测 SCD-1 mRNA 和蛋白的表达，应用 CCK-8 法检测转染前后 EC1 细胞增殖的变 化，FCM 检测转染前后 EC1 细胞凋亡的改变，蛋 白质印迹法检测总 Akt 、p-Akt 、bcl-2 和 bax 蛋 白的表达。结 果：食管鳞癌组织中 SCD-1 mRNA 和蛋白表达的阳性率显著高于正常食管黏膜组织 （ P ＜ 0.05 ），其表达上调与 肿瘤组织分级、TNM 分期和淋巴结转移密切相关 （P ＜ 0.05 ）。此外，与正常食管组织相比，食管鳞癌 EC9706 、 Eca109 和 EC1 细胞中 SCD-1 mRNA 和蛋白表达均显著上调 （P ＜ 0.05 ），其中 EC1 细胞中 SCD-1 的表达水平 最高。50 nmol/L SCD-1 siRNA 能显著下调 EC1 细胞中 SCD-1 mRNA 和蛋白的表达。SCD-1 表达下调可显著抑 制 EC1 细胞的增殖，诱导细胞凋亡；同时，显著上调 bax 蛋白的表达，并下调 p-Akt 和 bcl-2 蛋白的表达，但不 改变总 Akt 的表达水平。结论：SCD-1 可能在食管鳞癌的发生和发展中具有重要作用，抑制 SCD-1 的表达有望 成为食管鳞癌重要的分子治疗策略之一。 [关键词]　食管肿瘤；硬脂酰CoA 去饱和酶；细胞增殖；细胞凋亡；原癌基因蛋白质c-akt [中图分类号]　R735.1 [文献标志码] A [文章编号]　1000-7431 (2012) 09-0681-08 Down-regulation of stearoyl-CoA desaturase 1 expression inhibits cell proliferation and induces apoptosis of esophageal squamous cell carcinoma and their related molecular mechanism 1 1 1 1 1 2 GAO Hui , FENG Ying-qin , ZHU Jin-feng , HE Xing-duan , LU Pei