细胞共培养技术的研究进展.pdfVIP

·３３０· 中国药理学与毒理学杂志２０１１年６月第２５卷第３期　ＣｈｉｎＪＰｈａｒｍａｃｏｌＴｏｘｉｃｏｌ，Ｖｏｌ２５，Ｎｏ３，Ｊｕｎ２０１１ 细胞共培养技术的研究进展 张　茜，金若敏 （上海中医药大学药物安全评价研究中心，上海 ２０１２０３） 　　摘要：目前，两种细胞之间的共培养方法包括直接共培养和间接共培养，而共培养体系主要用于诱导细胞向另一种细胞 分化、诱导细胞自身的分化、维持细胞的功能和活力、对细胞增殖进行调控、促进早期胚胎的发育和提高代谢物的产量。目前 细胞共培养体系主要用于药效方面的研究，而用于毒理学方面的研究却很少。但是，由于共培养体系缩短实验次数、减少药 物使用量、辨别药物的优先毒性靶器官和研究药物代谢产物的毒性作用等优点，使之成为未来细胞毒理学研究发展的方向之 一。本文就细胞共培养技术的方法进行综述，并对共培养体系研究的应用进行了概述。 关键词：细胞；共同培养技术；药物利用评审 中图分类号：Ｒ９６５．２　　文献标志码：Ａ　　文章编号：１０００３００２（２０１１）０３０３３００３ 　　ＤＯＩ：１０．３８６７／ｊ．ｉｓｓｎ．１０００３００２．２０１１．０３．０２２ 　　在药理学和毒理学实验中，最常用的方法有两种，整体 胰岛细胞与储脂细胞共培养对肝细胞功能的影响时，先将储 动物在体实验和体外实验，其中体外实验包括对动物离体器 脂细胞加入培养瓶中，培养条件及培养液同肝细胞，培养４８ｈ ［１］ 官、离体组织、细胞和病原体的实验等 。 后将培养液弃去，再加入肝细胞和胰岛细胞，３种细胞的培养 采用细胞进行体外实验时涉及细胞培养技术，细胞培养 ［５］ 比例为４０００∶２００∶１；王金晶等 将肝窦血管内皮细胞种植在 是将细胞置于体外条件下进行生长和繁殖，由于培养物是单 包被胶原的２４孔培养板中，待细胞铺展成片后，将一部分肝 个细胞或细胞群，所以在培养的过程中细胞不再形成组织 实质细胞植于其上的共培养体系。 间接共培养体系，即 ② （动物）。细胞实验具有可直接观察活细胞的形态结构和生 将２种或２种以上的细胞分别接种于不同的载体上，然后将 命活动、直接观察细胞的变化、易于提供大量生物性状相似 这两种载体置于同一培养环境之中，使不同种类的细胞共用 的实验对象以及耗资少等优点。虽然过程中细胞独立生存 ［６］ 同一种培养体系而不直接接触，例如高毅等 将分别接种于 于人工模拟的体内环境，但该环境与真实的体内环境相比仍 盖玻片上的人骨髓来源多能成体祖细胞在与人肝细胞系 有很大差异，因而细胞实验结果不能完全等同于在体实验结 ＬＯ２细胞，按照各１∶１共置于培养皿中，来观察培养液共通时 果。为了能够建立更类似于体内环境的培养体系，尽可能使 ［７］ 肝细胞特征性表型表达的变化情况；卢晓露等 利用ｔｒａｎ 体外环境与体内环境相吻合，从而使细胞间能相互沟通信 ｓｗｅｌｌ小室（又称Ｍｉｌｌｉｃｅｌｌ插入式细胞培养皿），将肾小管上皮 ［２］ 息，相互支撑生长增殖 ，２０世纪８０年代后期，人们在细胞 细胞接种于６孔共培养板的上室滤膜上，加入药物，同时将 培养技术的基础上发展出了细胞共培养技术。细胞共培养 肾间质成纤维细胞接种于另一６孔共培养板的下室进行培 技术是将２种或２种以上的细胞共同培养于同一环境中的 养，