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萘乙酸和Zn对大豆Cd胁迫伤害的缓解效应
黄运湘1,廖柏寒2*,肖浪涛3,王志坤4
1. 湖南农业大学资源环境学院,湖南 长沙 410128;2. 中南林业科技大学国际学院,湖南 长沙 410004;
3. 湖南农业大学植物激素实验室, 湖南 长沙 410128;4. 浙江林学院理学院,浙江 杭州 311300
为探讨植物生长调节剂对大豆Cd胁迫伤害的缓解效应,采用营养液培养试验方法,研究了喷施萘乙酸(NAA)和加Zn处理对3个Cd胁迫大豆幼苗的影响。结果表明,加Zn和喷施NAA均可降低Cd胁迫大豆幼苗叶片丙二醛(MDA)和脯氨酸(PRO)含量,可减轻膜脂的过氧化作用及蛋白质的水解;喷施NAA还可降低Cd胁迫大豆幼苗POD活性,提高硝酸还原酶(NR)活性;加Zn对Cd胁迫大豆幼苗NR活性的降低缺乏抑制作用,但降低沔1101叶片中POD活性,提高湘04-6和特早熟毛豆的POD活性,品种之间表现明显的差异性。
Cd胁迫;大豆;萘乙酸;Zn;缓解效应中图分类号:X 文献标识码:A 文章编号:1672-2175(200)0-0232-05土壤重金属污染已日益成为困扰现代社会的主要环境问题之一,对人类的生活和健康带来了严重的影响。目前世界上有超过1亿的人口暴露在重金属元素逐渐上升的有害环境中,其中至少有数百万人遭受不同程度的重金属中毒,像日本出现的就是分别由汞、镉中毒而引起的。目前防治植物重金属污染的措施主要是通过客土深翻、调节土壤pH值[1]、施用有机肥料[2]或大分子有机物质[3]以及增施磷肥[4]等来降低重金属元素的生物有效性。而着眼于提高植物自身的防御机能,减轻重金属致害方面的研究近年来也有少量报道。如外施不同浓度的细胞分裂素类物质6-BA可缓减Hg2+对水花生的毒害作用[5]。在Cd伤害的菜豆[6]、大豆[7]幼苗叶片上喷施稀土元素镧,可减轻Cd对幼苗的伤害程度。以抗坏血酸和铁盐[8]处理Cd毒害的大蒜根尖,可起到解毒作用。施用水杨酸[9]、脱落酸[10]能减轻大麦幼苗Cd的毒害作用。本文以不同Cd敏感型大豆品种为试材,以植物生长调节剂萘乙酸(NAA)和微量营养元素Zn为调控因子,探讨其对大豆Cd毒害的防护作用,为重金属污染植物的生态防御研究和提高超积累植物的修复效率提供参考。
选自湖南农业科学院培育的湘春豆15、湘春豆13、湘04-1、湘04-6,湖北省农科院培育的沔1101,南京农业大学培育的南春豆204,江西新余市蔬菜种子经营部提供的292,江苏省江蔬种苗科技有限公司提供的早生白鸟,安徽省合肥丰乐种业股份有限公司提供的特早熟毛豆和本地常规种10个大豆品种进行耐镉差异性研究。根据Ashraf Metwally[11]耐镉指数[TI(%)=Fwt/Fwc×100-100,其中Fwt为镉处理大豆生物产量,Fwc为对照处理大豆生物产量]进行计算判断,湘春豆13、沔1101和本地常规种抗镉能力较强,特早熟毛豆、早生白鸟抗镉能力较弱,其余品种抗镉能力中等。本文以沔1101(抗Cd能力较强)、湘04-6(抗Cd能力中等)和特早熟毛豆(抗Cd能力较弱)为供试材料研究蔡乙酸(NAA)和Zn对大豆镉胁迫的缓解作用。
选取籽粒饱满的大豆种子用0.5%次氯酸钠溶液浸泡消毒,去离子水冲洗干净后,置40 ℃恒温培养箱中催芽。将发芽势一致的种子播于盛有蛭石的塑料盆中(长25 cm,宽18 cm,高10 cm),并浇1/2 Hoagland营养液,将塑料盆移入湖南农业大学资源环境学院玻璃网室中。大豆长出子叶后浇Hoagland全营养液,待长出第2对真叶时,选择长势一致的幼苗移入塑料桶(Φ18 cm,高15 cm)进行营养液培养处理,每桶盛培养液1000 mL,每桶种豆苗10株,共设5个处理:处理1(CK1):Hoagland完全营养液;处理2(CK2):CK1+1.0 mg·L-1Cd2+;处理3:CK2+1.0 mg·L-1Zn2+;处理4:CK2+1.0 mg·L-1NAA;处理5:CK2+1.0 mg·L-1Zn2++1.0 mg·L-1NAA。Zn2+以ZnSO4的形式直接加入到培养液中,NAA通过叶面喷施进行处理,以蒸馏水为对照,隔天喷施1次,共喷3次,每次喷至叶面滴水为止。为达到理想的喷施效果,在配制NAA时加入少量吐温-80。每处理重复3次,共15个处理。幼苗培养期间(共7 d)每天通风1次,更换1次培养液。
幼苗经NAA和Zn处理7 d后取鲜样测定各项生理指标,测定方法参照朱广廉[12]的植物生物学实验。
丙二醛(MDA)含量的测定采用硫代巴比妥酸法。称取0.50 g大豆叶片,剪碎,用 5 mL 5% 三氯乙酸(TCA)溶液研磨成匀浆,离心。取上清液2 mL,加0.67%硫代巴比妥酸(TBA) 2 mL10
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