大肠杆菌植酸酶在毕赤酵母中的表达与纯化.pdfVIP

下载本文档

29
0
约2.49万字
约 4页
2017-09-17 发布于安徽
举报
版权申诉

大肠杆菌植酸酶在毕赤酵母中的表达与纯化.pdf

1、原创力文档（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。。
2、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击这里二次下载。
3、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
4、该文档为VIP文档，如果想要下载，成为VIP会员后，下载免费。
5、成为VIP后，下载本文档将扣除1次下载权益。下载后，不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
6、成为VIP后，您将拥有八大权益，权益包括：VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
7、VIP文档为合作方或网友上传，每下载1次，网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等，对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档

1 2012-08-25 DOI: 10.3724/SP.J.1145.2012.00678 / Chin J Appl Environ Biol 2012 18 ( 4 ) : 678~681 应用与环境生物学报， * 大肠杆菌植酸酶在毕赤酵母中的表达与纯化张耀华姚明泽卢文亮梁爱华** （山西大学生物技术研究所，化学生物学与分子工程教育部重点实验室太原 030006）摘要为探讨植酸酶的结构与功能，研究了来源于大肠杆菌的植酸酶基因在酵母中的表达和纯化条件. 将含有大肠杆菌植酸酶基因的毕赤酵母工程菌在不同甲醇浓度和不同诱导时间下培养，检测植酸酶的表达情况 . 结果表明：诱导培养基中一次性添加2.5%的甲醇，诱导96 h后，蛋白浓度达到 1.36 mg mL-1 ，酶活力达到6 530 U mL-1 ；将在毕赤酵母中 Resource S Superdex-75 137 280 U 表达的植酸酶粗酶液经过硫酸铵盐析、柱和三步纯化，得到单峰纯的蛋白，比活力为 mg-1. 用圆二色谱分析纯化后的蛋白在pH 5.0和 8.0环境中的结构变化，结果显示pH 8.0环境使大肠杆菌植酸酶发生了变性. 图3 参 16 关键词大肠杆菌植酸酶；毕赤酵母；甲醇浓度；表达与纯化；圆二色谱 CLC Q556.9 : Q936 : Q786 Expression and Purification of Phytase appA in Pichia pastoris* ZHANG Yaohua, YAO Mingze, LU Wenliang LIANG Aihua** (Key Laboratory of Chemical Biology and Molecular Engineering of Ministry of Education, Institute of Biotechnology, Shanxi University, Taiyuan 030006, China) Abstract Phytase (appA) from Escherichia coli was expressed in yeast Pichia pastoris. Different methanol concentrations and induction times were tested to get appA expressed efficiently. The results showed that after induction of 96 h with 2.5% -1 -1 of methanol, the concentration of protein reached 1.36 mg mL , specific activity of phytase reached 6 530 U mg . The crude phytase express