重金属Cu2+, Pb2+ 和Zn2+ 胁迫对近江牡蛎(Crassostrea rivularis) SOD 活性影响研究.docVIP

重金属Cu2+，Pb2+Zn2+胁迫对近江牡蛎 (Crassostrea rivularis) SOD活性影响研究 江天久1, 3*，牛 涛暨南大学，广东 广州 510632. 华南师范大学生命科学技术学院，广东 广州 510631 摘要：为探讨将近江牡蛎（Crassostrea rivularis）抗氧化酶防御体系参数作为海洋重金属污染生物监测指标可行性文在实验室条件下，研究这三种重金属暴露对近江牡蛎（C. rivularis）鳃和消化腺组织SOD活性的诱导作用；实验结果表明：Cu2+, Pb2+和Zn2+能诱导近江牡蛎（C. rivularis）腮和消化腺SOD的产生，但由于近江牡蛎（C. rivularis）腮和消化腺的结构和功能的不同，在重金属的诱导下，消化腺内的SOD活性要比腮的大；Pb2+和Zn2+诱导近江牡蛎（C. rivularis）鳃和消化腺组织SOD活性变化的剂量－效应均为抛物线型；Cu2+对近江牡蛎（C. rivularis）鳃组织SOD活性诱导曲线不呈抛物线型，而对消化腺组织SOD活性诱导的剂量－效应呈抛物线型；三种重金属对近江牡蛎（C. rivularis）的毒性强弱顺序为Cu2+＞Pb2+＞Zn2+。在实验室条件下，近江牡蛎（C. rivularis）消化腺组织中的SOD活性可作为养殖水体重金属污染程度监测指标，但应用到实际养殖水体尚须进一步研究。 关键词：近江牡蛎；重金属；超氧化物歧化酶； X171.5 文献标识码：A 文章编号：1672-2175（2006）02-0289-06许多水生生物对重金属等污染物有很强的累积能力，可作为海洋污染的监测生物。但其体内污染物含量不能及时反映海洋污染的动态变化，也不能反映污染物对生物体生理生化的影响。水生动物生活在水体环境中，这个特殊环境的细微变化都将对它们的生理生化产生一系列的影响。有研究表明溶解氧、pH值、温度、重金属污染等，都会使其体内SOD活性发生显著变化[1]。所以对水生生物来说，SOD是一类敏感的分子生态毒理学指标[23]。国外已有一些科技工作者开展了旨在探讨以抗氧化酶作为水体污染监测指标的基础性工作以抗氧化防御系统参数作为海洋污染生物监测指标，存在许多问题，需要在更多的有代表性的水生生物和常见的污染物之间做更多的基础研究。 近江牡蛎（Crassostrea rivularis）在南北沿海均有养殖，更是我国南方养殖主要经济贝类，抗氧化酶防御体系参数作为重金属污染生物监测指标。本研究选取近江牡蛎鳃和消化腺组织为研究对象鳃是直接暴露于水体的组织，消化腺是其体内主要的解毒器官，对这两种组织的生理状况影响较为显著探讨近江牡蛎抗氧化酶防御体系参数作为海洋重金属污染生物监测指标可行性，为受到不同重金属污染的海区选择适宜的牡蛎品种提供理论依据。 选择2龄近江牡蛎，体型、体重相差±10%左右，实验前将近江牡蛎洗刷干净，清除附着物，置沙滤海水水泥池中暂养一周左右。暂养在自然光照和室温下进行，暂养期间不投喂饵料，昼夜连续充氧以保证水中溶氧充足。 实验海水为无污染沙滤海水，其重金属浓度经测定符合一类海水标准（G（实验期间水质由深圳市海洋与渔业环境监测站监测）。实验期间水温为1724 ℃，pH值为7.87.9，盐度为34‰左右。实验时，配制海水盐度为20‰，用去离子稀释（使用之前用充氧机连续曝气48 h以上）。实验期间每天换水一次，同时添加重金属污染物，使各组水体中重金属浓度保持设定浓度（表1）。实验期间不投喂饵料，昼夜连续充气以保证水中溶氧充足。 Cu2+、Zn2+、Pb2+三种重金属按照海水养殖用水水质标准（N和相关文献[]分别设低、中、高三种浓度处理组（表1），并设一组空白对照组（共10组）。每组养近江牡蛎8只，每桶装海水40 L。暴露试验共进行6。实验结束后，去除牡蛎外壳，取其软组织，用蒸馏水冲洗其软体组织数次，用滤纸拭干后装入样品袋内于70 ℃保存至酶活性测定。 表1 各组重金属污染物的设定浓度 Tab. 1 The concentration of heavy metals in seawater mg·L-1 组别 1（低浓度组） 2（中浓度组） 3（高浓度组） Cu0.1 0.5 1.5 Pb2+ 0.2 1.0 3.0 Zn2+ 0.2 1.0 3.0 1.2.2 样品处理方法 将近江牡蛎样品置于冰箱冷藏室内解冻后，用滤纸拭干，分别取其鳃和消化腺组织，经组织匀浆机匀浆后，准确称取0.50 g放入玻璃匀浆器内，加三蒸水2 ml冰浴匀浆，匀浆液倒入离心管中，加3 ml三蒸水冲洗匀浆器，也倒入离心管中，在4 ℃以4500 r/min转速离心30 min，取上清液，