工艺原理（四）.pptVIP

第四章 培养基的灭菌与空气净化  第一节 培养基的灭菌 一、灭菌的意义和方法: 干热灭菌与湿热灭菌 区别 空罐灭菌与实罐灭菌 在哪？ 过滤灭菌与化学药剂灭菌 间歇灭菌与连续灭菌 Q: 消毒与灭菌的概念及区别 二、 湿热灭菌的原理 基本要求：杀死培养基中混杂的微生物，满足纯种培养的要求。 Q: 湿热灭菌为什么效果好？ t ：表示理论灭菌时间 一般只用于工程计算中，在实践过程中，因蒸汽的压力问题（不稳定）、蒸汽的流量问题有很大差别，甚至培养基中的固体颗粒的大小、培养基的粘度等因素，都会影响灭菌效果 间歇灭菌，121℃，20—30分钟 连续灭菌，130℃，20—30s，在 维持罐中保温6-8分钟。 N0 ： 芽孢性细菌总数 + 芽孢数 对于如何Nt取值？ 如果取Nt= 0，那么，t → ∞，这显然是与现实情况不符。 通常取Nt = 10-3 Q: 这个数值如何理解？ 灭菌1000次，有一次是失败的，残留了一个活菌体。这个数值的取值的大小，也间接反应了该生产过程中的技术管理水平。 在灭菌的过程中，伴随微生物的死亡，培养基中的营养成分也遭到破坏。由于大部分培养基的破坏为一级分解反应，其反应动力学方程式为： 式中：c——反应物的浓度，mol/L； t——反应时间，min； k′—营养成分破坏的反应速度常数，min-1 在灭菌的同时，培养基中的营养成分也遭到破坏，其他条件不变，则反应速度常数和温度的关系可用阿累尼乌斯方程表示： 式中：?′——比例常数； E′——反应所需的活化能,，J/mol； R——气体常数；8.314 J/mol·k； T——绝对温度， K； 　 三、培养基的灭菌 1. 培养基灭菌的操作 连续灭菌：指培养基经过蒸汽灭菌后连续的进入 发酵罐。 连续灭菌的流程3 连续灭菌的流程4 发酵培养基实罐灭菌： 先预热90 ℃ ，根据罐容大小确定，一般121℃， 5-10分钟 泡敌实罐灭菌： 0.2MPa下保持30分钟 尿素罐灭菌： 105℃保持5分钟 管道灭菌： 接种管道、尿素管道、油罐管道、空气管道，0.15MPa 40~60分钟。 2. 影响培养基灭菌的因素 培养基的成分 pH值 培养基的颗粒大小 泡沫 培养基微生物的数量 微生物细胞的含水量和耐热性 菌龄 空气排除的情况 3. 培养基灭菌时间的计算 发酵罐装有85m3培养基，121 ?C 灭菌。原污染程度为每mL有2＊105个芽孢菌，有5＊103个一般细菌，灭菌常数为1.8min-1 。 4. 连续灭菌的优点 受热时间短营养破坏少 发酵罐利用率高 使用蒸汽均衡，自动化控制 回收冷却水，蒸汽消耗60-70% 第二节 空气的净化 无菌空气的质量要求 1. 无菌空气的压强：0.2-0.4MPa（表压） 2. 相对湿度小于70% 3.空气温度比培养温度高10-30度 4.空气的洁净度，一般取10-3为指标 加热灭菌 辐射杀菌 静电除菌 介质过滤除菌 布朗扩散运动 拦截截留作用 惯性撞击截留作用 重力沉降作用 静电吸引 三、空气过滤除菌一般的流程 四、空气过滤介质 纸类过滤介质 　　应用时需将３－６张滤纸叠在一起使用，过滤效果相当好，但强度不大。 纤维状或颗粒状过滤介质 　　棉花、玻璃纤维、活性炭。 微孔滤膜类过滤介质 五、介质过滤效