高效毛细管电泳2安培检测法用于芦丁水解常数的研究.pdfVIP

( ) 第 31 卷 分析化学 FENXI HUAXUE 　研究报告 第 7 期 　　　　　　　　　　　　 　　　　　　　　　　　　 2003 年 7 月 Chinese Journal of Analytical Chemistry 779～784 高效毛细管电泳安培检测法用于芦丁水解常数的研究 1 ,2 1 1 2 张　兰 　陈　强 　陈国南 　方禹之 1 ( ) 2 ( ) 福州大学化学系 ,福州 350002 　　 华东师范大学化学系 ,上海 200062 摘 　要 　用高分辨率、高灵敏度的毛细管电泳安培检测法对芦丁水解的速率常数进行了研究 ,建立了芦丁及 其水解产物槲皮素的定量分析方法。在优化电泳条件下 ,该方法能同时检测芦丁和槲皮素的峰电流随水解反 应的进行而发生的变化。根据芦丁随着水解时间的不同而发生的浓度变化 ,计算求得水解的速率常数 ,并总 结了温度对速率常数影响的规律。将方法用于芦丁和槲皮素的检测 ,芦丁与槲皮素的检测限分别为 0. 6 gL 和 6. 2 mgL ;RSD ( n = 7) 分别为 2. 36 %和 3. 12 % 。用于槐米中芦丁检测的回收率为 97. 6 % 。分析结果表明 , 此法用于测定芦丁水解常数简便、直观 ,用于芦丁和槲皮素的检测可靠性和重现性均很好。 关键词 　毛细管电泳 ,安培检测法 , 速率常数 ,芦丁 ,槲皮素 ,槐米 1 　引　　言 高效毛细管电泳( HPCE) 作为一种新型的分离技术 ,与传统的分离方法相比 , 具有简单、高效、快 1 ,2 ( ) 速、微量和易于自动化等特点 。安培检测 AD 作为电化学检测中最普遍的一种方法 , 自从 1987 年 由 Ewing 等人将该方法引入毛细管电泳中之后 , 由于 HPCEAD 联用不但分离效率好 ,而且灵敏度高 ,所 以近年来发展很快3 ,4 。但时至今日 ,HPCEAD 主要研究范围还局限在定量分析领域 ,将它应用于物理 化学常数的研究还很少 ,本文拟挖掘 HPCEAD 在理化常数研究方面应用的潜能5 ,6 。 芦丁又名槲皮甙 ,具有抗炎、抗病毒和抑制醛糖还原酶等作用。临床用于防治脑溢血、高血压、视网 膜出血、紫瘢和急性出血性肾炎7 ,8 。芦丁在酸性条件下可分解为槲皮素和芸香糖。槲皮素是许多天然 中药的主要成分 , 如高良姜、鱼腥草、柴胡等均含有槲皮素 , 它具有良好的祛痰、止咳和抗自由基作 用9 ,10 。由于芦丁在一定条件下易于水解 ,而芦丁和其水解产物槲皮素在疗效上又存在差异 , 因而了解 芦丁的水解条件和水解动力学常数就显得非常重要。芦丁、槲皮素和芸香糖均是电活性物质 , 而它们 在高压电场下的毛细管中的迁移速率又不同 , 因此 ,可望利用 HPCEAD 法同时检测反应物和产物的响 应电流随水解反应的进行而发生的变化 ,进而求得芦丁水解的速率常数。方法简便、直观。该方法还可 以用于中草药中芦丁和槲皮素的定量分析11 ,12 。 2 　实验部分 2. 1 　仪器与试剂 13 ( ) ( 自组装的毛细管电泳安培检测装置系统 :高压电源 0～ ±30 kV 中国科学院上海原子核研究 )