超氧化物歧化酶的研究与应用.pdfVIP

$##) 年第/ 期 化学与生物工程 超氧化物歧化酶的研究与应用 杨东升 （海南大学理工学院生物工程系，海南 海口!#$$% ） 摘 要：研究了超氧化物歧化酶的研究进展，阐述了基于其结构和活性进行的清除氧自由基的机制和化学修饰的作 用原理以及超氧化物歧化酶在医学领域和生物保健领域的最新应用发现。 关键词：超氧化物歧化酶；自由基；应用；研究 中图分类号： ’%() * ( ’%() * + 文献标识码：, 文章编号：(-$ . !)$!（$##) ）#/ . ### . #/ 性测定方法并不统一，因此未能进行横向比较。C:D ! 概述 的提取方法主要有分步盐析法、有机溶剂沉淀法、层析 (+-% 年 012345 和 647538719 成立自由基协会， 柱法等。 (+-+ 年他们从牛血红细胞中发现了一种专一清除超 # * ’ 微生物$% 的分离提取 氧阴离子（: . ·）的关键酶，并命名为超氧化物歧化 $ * /* ( 酵母C:D 的提纯 $ 酶（;=43?75 57;@AB; ，C:D ）。C:D 是一种极其有 有下列几种方法破壁制备C:D 粗酶液：超声波处 效的抗氧化剂，能抵御超氧阴离子自由基（E4 4B57BF 理法 （H2F$ 型超声波处理仪处理! @7I ）、细胞自溶法 1BG ）对细胞的破坏。研究显示，C:D 可能是人体内最 （提取! 9 ）、酶裂解法 （$ J 蜗牛酶液，/# K 保温L ! 重要的酶之一，能有效控制超氧阴离子自由基，保持人 9 ）、氯仿 . 乙醇法。将酵母菌种进行摇瓶培养，经离 体细胞膜年青、柔软和健康的状态。C:D 在大自然中 心收集后的菌体悬浮在磷酸盐缓冲液中，超声破壁。 普遍存在，不仅在需氧代谢细胞中存在，甚至在厌氧细 离心除去残渣 ，得粗酶提取液。将此液按! M / 的比 菌中也有发现。C:D 也像其它存在于人体内的保护 例加入乙醇、氯仿，搅拌$ 9 ，离心除杂蛋白，上清液加 性成分一样，随着年龄增加而减少，使细胞更易受到氧 化剂的攻击，从而引起老化和疾病。 入N$ OP:) 离析，水层离心 （(/ ### Q R ），上清液加入 #L ! 倍冷丙酮，得白色沉淀，将沉淀溶解于#L #$! @3G # $% 的分离提取 ·S . ( =O L - 磷酸盐缓冲液，透析过夜，除去小分子物 # * ! 动物$% 的分离提取 质，离心后上DT,TF/$ 柱，然后用$L ! U !# @@3G ·S . ( 动物C:D 是最早为人们所认知的，它的分离提取 =O L - 磷酸盐缓冲液进行梯度洗脱 ，收集具有 C:D ［! ］ 技术也较为成熟。人们相继从牛、猪、羊、马等动物红 活性的洗脱液 。 细胞、肌肉、肝脏组织中分离和纯化出C:D 。C:D 常 $ * /* $ 细菌C:D 的提纯 用纯化制备方法有离子交换法、疏水色谱法、凝胶过滤