沉积物中多糖的微波消解及气相色谱分析朱小萤’卫潘建明.pdfVIP

第 35 卷 分析化学 (FENx1HUAXUE) 研究报告 第8期 21洲)7年8月 Chillee‘jourll日】ofAn目ytica1Chemi日try 1127~11飞1 沉积物中多糖的微波消解及气相色谱分析 朱小萤’卫 潘建明’，2‘刘小涯，2‘朱纯，，2 薛斌’，2 ，(国家海洋局第二海洋研究所，杭州 310012) 2(国家海洋局海洋生态系统与生物地球化学重点实验室，杭州 3100]2) 摘 要 建立 了采用硫酸体系微波消解沉积物中多糖，乙酞化后用气相色谱同时分离测定7种单糖的分析方 法。考察J户温度和微波消解时间对多糖水解效率的影响，实验表明在 looT下消解60m访达到最高效率.将 水解得到的单糖还原并乙酸化，采用HP一5石英毛细管柱(30mxo.犯mm，。25 卜m)为色谱柱，利用气相色 谱法对7种单糖进行分离测定，总分析时间32min。用保留时间定性，内标法 (以各个单糖的标样峰面积/内 标样峰面积)进行定量。加样回收率为63% 一106%，重现性测定平均相对标准偏差(邸1劝为6.7%。实验结 果表明木法是一种快速、有效测定沉积物中糖类物质组成的方法 关键词 沉积物，糖，微波消解，气相色谱 1 引 言 糖类物质是一类在自然界中分布极为广泛的有机质。在沉积物中，糖类物质通常以多糖形式存在， 经酸可以水解成各种单糖。通过在分子水平上对沉积物中单糖组分与含量进行研究，能够判别物质的 来源，获得沉积环境以及反应有机质演化等方面的信息’周「。对于沉积物或生物体样品中的多糖，Bur- ney等[3〕采用Hcl水解，ches卜ire等14]采用HZso、水解。这些研究表明，由于HZso;不易挥发所以比 Hcl更适合在较高温度下水解多糖。而Fengel等[5]用沸腾的4、FL三氟乙酸(TFA)水解多糖，其优 点是它能够直接被蒸干而不必加人碱性物质进行中和，而且水解单糖的产率接近甚至超过用硫酸水解 的水平。 Ch山tos川和梁立娜r，1等用HpAEc一PAD的方法分析多糖水解后的单糖。而气相色谱法，因其具有 高分离效能、高检测性能、分析时间快速而被广泛用于食品及植物中多糖组成的分析:卜”」。用气相色 谱分析多糖组成，需要先将多糖水解成单糖，而传统的水解方法费时，微波消解力一法具有方便，快捷的特 点，大大提高了工作效率。由于糖类是高沸点物质，必须通过衍生方法降低其沸点才可进行气相色谱分 析。因此，衍生化技术也成为研究的一个热点，何碧烟等’2「;采用了硅烷化衍生单糖的方法，Rumpel 等 ”「」则采用了乙酞化的方法。硅烷化的方法比乙酞化在前处理步骤L要简单一些，但是硅烷化后每一 种单糖都产生一个以上的色谱峰，对定量分析造成困难。乙酞化的优点在于每种单糖经过乙酞化处理 后没有异构中心，只产生一个色谱峰便于定性定量，而且具有较高灵敏度。 邓永智等 4「飞‘利用微波法提取海水小球藻中多糖，但利用微波消解法进行沉积物中多糖成分的测定 研究在国内未见报道。本研究选取较为稳定的HZSO;配合微波消解方法水解沉积物样品中多糖，考察 了温度和消解时间对水解效率的影响。建立了一套快捷有效的气相色谱方法，进行沉积物中多糖成分 的定性定量研究。 2 实验部分 2.1 仪器与试剂 沉积物样品采自长江内河芜湖港，样品采集后在一18℃下冷冻保存，回到实验室后在50℃下烘千 并碾磨。 2，陷伪刁7收稿:2007 刁2仍 接受 本文系国家重点基础研究专项资助(NO.2002cB412505) *E一mail:jmp即@hzcn。， 万方数据 112R 分 析 化 学 第 35卷 MARss微波萃取消解系统(CEM公司);Hp6890N气相色谱仪(Agilent公司);Mili一Q纯水机(Mili- pore公司)。 阿拉伯糖(美国Fluka公司)、岩藻糖(ACR0s0RGAMcS公司)、葡萄糖(分析纯，国药集团化学试 剂有限公司)、鼠李糖(Fluka进口封装)、半乳糖(生化试剂，上海恒信化学试剂有限公司)、甘露糖(分 析纯，海「伯奥生物科技有限公司)、木糖(生化试剂，国药集团化学试剂有限公司)、BasO‘