HPLC 法测定人工蛹虫草子实体中虫草素.pdfVIP

2003年 1O月 西北大学学报 (自然科学版) 0ct．2003 第 33卷第 5期 JournalofNorthwestUniversity(NaturalScienceEdition) Vo1．33NO．5 HPLC法测定人工蛹虫草子实体 中虫草素 陈千 良 ，甘志杰 ，孙文基 (1．西北大学 生物 医药重点实验室 ，陕西 西安 710069；2．汉 中药 品检验所 ，陕西 汉 中 723000) 摘要：为测定人工蛹虫草子实体及培养基 中的虫草素，采用高效液相色谱法(HPLC)，以十八烷基 硅烷键合相硅胶为 固定相 ；磷酸盐缓冲溶液 (pH6．5)一甲醇 (85：15)为流动相 ；检测波长 260nm；其 流速为 lmL／min。结果是人工蛹 虫草子 实体 中虫草素含量在 1．1l ～1．44 之间，平均值为 1．29 ，RSD为 9．6 。天然冬虫夏草 中仅测得痕量虫草素。结果表明：不同的人工蛹虫草样 品中虫 草素含量有一定差异，且高于天然冬虫夏草 。 关 键 词 ：蛹虫草；虫草素 ；高效液相 色谱 中图分类号 ：R284．1 文献标识码 ：A 文章编号 ：1000—274X(2003)04—0569—03 冬虫夏草是我 国名贵滋补药材 之一 ，由于产 于 1．2 试 剂 高原 ，数量有限，价格 昂贵。蛹虫草 (Cordycepsmili— 纯水 (用超纯水器制备 ，电导率 10 MEI)甲醇 tarisL．Link)又称蛹草、北虫草 ，为冬虫夏草同属的 及其他试剂均为分析纯 ，虫草素对照 品由北京 中医 真菌，现 已能够大规模人工栽培 。化学成分与天然冬 药大学雷海 民博士赠予 ，HPLC面积归一化法检查 虫夏草基本相 同，并 具有与天然冬虫夏草相似 的药 纯度达 100 。 理作用。可以考虑将其作为天然冬虫夏草 的替代 品 1．3 试验材料 用于医药和滋补保健 品[1]。虫草素 (Cordycepin)能 人工培养蛹虫草子实体及培养基 (西北大学泾 抑制枯草杆菌、鸟结核杆菌 ，而且对 小 鼠艾 氏腹水 阳菌类研究所提供)，天然冬虫夏草药材 (青海产 ，购 癌、人鼻咽癌 KB细胞及小 鼠$18O瘤细胞均有抑制 自西安 国大药房) 作用[3]，是蛹虫草的重要活性成分 ，其含量 的测定对 蛹虫草 的质量控制有重要意义。本文改进 了已有的 2 方法与结果 虫草素测定方法 [4]，调整流动相 ，测定 了不 同人工虫 草样本和培养基 中虫草素的含量 ，与天然 冬虫夏草 2．1 高效液相色谱条件 作了对 比。对蛹虫草不同外观性状与含量高低作 了 色谱柱 ：Cl8柱 (4．6mm ×250mm，5 m)；流动 初步简单的考察 。 相 ：磷酸盐缓冲溶液 (pH6．5)一甲醇 (85：15)流速 l mL／min；紫外检测波长 260nm，在此条件下 ，虫草 1 仪器与试药 素保 留时间为 l1．3min，见图 l。 2．2 线性关系考查 1．1 仪 器 精密称量干燥 虫草素对照品适量置于量瓶 中， 日本 HITACHI高效液相色谱仪 (L一7ll0泵 ， 甲醇溶解定容 ，制成 25．1~tg／mL的对照品溶液。精 L一7420紫 外 可 见 光 检 测 器)，N2OOO色 谱 工 作 站 密吸取对照品溶液 4，6，8，l2，l4 L注入 高效液相 Varian2700C18不锈钢柱 (RaininandSuppliesCo， 色谱仪 ，记录色谱图。以进样量为横坐标 ，以峰面积 USA．)，赛 多利 斯 BP