离体异类神经元突触形成的初步研究.pdfVIP

学 学 200r7年第2卷第3—4期“^’’-a…【FZ7J一-rm 成fOURNA都LOFC医HECHENGDUMEDICAL院DIC COLLEGE LANRUojE报G ·科研快讯· 离体异类神经元突触形成的初步研究 文灿1，李淑蓉2，王晗知1，肖传国1，苏炳银3。 (1．第三军医大学基础医学部神经生物学教研室，重庆市神经科学研究所，重庆z100038；2．成都医学院病理学教研室； 3．成都医学院人体解剖与组织胚胎学教研室，成都610083) 截瘫病人可通过手术建立体神经一内脏神经反 细胞的标记物GFAP抗体作免疫荧光双标，辅以 射弧，来重构膀胱的神经支配，达到功能重建的目 Hoechst核染荧光显示细胞核，计数培养细胞中 的。在此过程中，出现了一种全新类型的突触躯体 运动神经与内脏神经的吻合建立了突触联系，但囿 SCGNs突触形成，用琼脂糖和PDL对培养盖片进行 于吻合术导致的组织粘连、炎性反应及组织成分的 “微岛化”处理，在其上低密度培养SCGNs，随后 复杂性，无法去除“干扰”，迄今缺乏对该类突触 用分子荧光探针DiI予以荧光标记，再将经差速贴 的认识。交感神经的节前神经元释放的神经递质主 壁的E16d胎鼠脊髓腹侧组织制成的细胞悬液接种 要为乙酰胆碱(acetaldehyde，ACh)，在神经节与节 后神经元形成突触，运动神经元也能释放ACh，颈 成的标记物P38抗体和ChAT作免疫荧光双标，显 cervical 示以SMNs为突触前神经元的突触形成情况，并用 lleUrOllS， 上神经节神经元(superiorganglion 突触计数、№tern SCGNs)上具有烟碱样ACh受体，那么，运动神经 元与交感神经的节后神经元能建立有功能的突触联 的情况，再在SCGNs上记录微小自发突触后电流 motoneu．(miniaturespontaneous 系吗?本研究将脊髓运动神经元(spinal 突触的形成，皆与单纯培养作对照比较。再次，借 Ions，SMNs)和SCGNs作共培养，对其突触形成进 行初步研究。 助烟碱型受体的特异性阻断剂(HEX)和乙酰胆碱 本研究中，首先用全培养液分离培养新生(小 于24 SD大鼠颈上神经节的 h)Sprague—Dawley 和受体作初步研究。 SCGNs。全培养液包括Neurobasal培养基，B27复合 添加剂，促运动神经元最强的细胞因子——胶质细 研究结果显示：①按此方法原代培养的SMNs cellderived 和SCGNs生长状态好，SMNs在培养14d后，生长 胞源性神经营养因子(glial neurotrophic 晕消失，胞质内出现小的黑色颗粒和空泡状结构， factor，GDNF)，交感神经元生长不可缺少的神经生