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叶酸脂质体的制备及其对肿瘤细胞靶向性研究 英语缩略词表 FA Folate acid 叶酸 FR Folic acid receptor 叶酸受体 GPI Glycosyl-phosphatidy linositol 糖基化磷酯酰肌醇 MTX Methotrexate 氨甲喋呤 PEG Polyethylene glycol 聚乙二醇 Ki Inhibition constant 抑制常数 EPE Encephalin 卵黄磷酯酰乙醇胺 KB Epidermal carcinoma cell 人表皮癌细胞 EPC Phosphatidylcholine 卵黄磷酯酰胆碱 DMSO Dimethyl Sulphoxide 二甲基亚砜 MTT Methyl thiazolyl tetrazolium 噻唑蓝 PBS Phosphate buffered saline 磷酸盐缓冲液 SKOV-3 Ovarian cancer cell 卵巢癌细胞 SUCA Succinic anhydride 琥珀酸酐 CHOL Cholesterol 胆固醇 BSA Bovine serum albumin 牛血清白蛋白 FCS Fetal calf serum 胎牛血清 SDSSodium dodecyl sulfate polyacry- 变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 lamide gel electropheresis I 叶酸脂质体的制备及其对肿瘤细胞靶向性研究 叶酸脂质体的制备及其对肿瘤细胞靶向性研究 目的： 初步探讨叶酸脂质体的制备工艺，并考察其对肿瘤细胞的细胞毒性和靶向性。 方法： 1、将叶酸、聚乙二醇二胺、琥珀酸酐、脑磷脂依次连接成为叶酸臂，取一定浓度的叶 酸臂与空白脂质体在 55℃孵育，采用 0.22μm 的微孔滤膜过滤，以制得粒径均匀的 叶酸脂质体。进一步采用冻融法包封 BSA ，通过 BCA 蛋白检测试剂盒检测 BSA 蛋 白浓度计算叶酸脂质体对BSA 的包封率。 2 、利用无叶酸培养基预培养 SKOV-3 细胞。当细胞增殖至指数生长期时，分别加入终 浓度为 0.2mg/ml 包封钙黄绿素的叶酸脂质体和普通脂质体与其共培养 8h，并在荧光 显微镜下观察细胞对荧光物质的富集情况。 3、利用无叶酸培养基预培养 SKOV-3 细胞。当细胞增殖至指数生长期时，加入不同浓 度的包封钙黄绿素的叶酸脂质体。再分别与细胞共培养 2 、4 、8、12、24 小时后， 用 DMSO 溶解细胞，并利用荧光酶标仪分别测定不同浓度的叶酸脂质体培养的 SKOV-3 细胞，在各时间点细胞溶解液的荧光吸光度，以确定 SKOV －3 细胞对叶酸 脂质体摄取的量效和时效关系。 4 、利用无叶酸培养基预培养 SKOV-3 细胞，分