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碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）脂质体的研究 摘 要 目的 研究制备bFGF 脂质体，建立其质量评价体系，并以大鼠烫伤模型考察其 促烫伤愈合的作用，为bFGF 脂质体的开发应用提供依据。 方法：①建立了间接ELISA 法测定bFGF 的含量。②以bFGF 脂质体包封率、物 理稳定性和生物活性为考察指标，分别采用单因素考察、全因素实验以及正交设 计优化处方和工艺条件。③采用 SDS电泳、显微镜技术和激光散 法考 察了bFGF 脂质体的理化性质，并按照 《中华人民共和国药典》要求进行了稳定 性考察。④以大鼠烫伤模型观察给药后各试验组创面愈合过程中的形态学、愈合 时间和愈合率的变化；氯胺T 法测定羟脯氨酸含量；采用免疫组化的方法考察创 面愈合中PCNA 和TGF- β的表达情况；观察给药期间bFGF 脂质体的内脏毒性。 结果：①建立的间接ELISA 法稳定可靠、灵敏度高（1.28ng/mL ）、重现性好。 ②通过实验最优化确定了最佳处方及工艺条件，所制备的bFGF 脂质体的包封率 为82.15±3.37 ％，其物理稳定性参数KE 为 1.02 ±0.413 ％；生物活性效价为 5 （6.147±0.7691 ）×10 IU/mL 。③ bFGF 脂质体平均粒径为120.0nm，ζ电位为 －48.30mV ，高温条件下不稳定，宜低温避光保存。④ bFGF 脂质体中剂量组和 高剂量组能显著性促进大鼠烫伤创面愈合，使创面愈合时间明显提前，其中，中 剂量组较阴性 照组提早5.0 天 （P0.01 ），较空白脂质体 （基质）组提前1.7 天 (P0.05) ；在给药期内无内脏毒性。 结论：研究制备的bFGF 脂质体包封率高，性质稳定，无毒无刺激性， 大鼠烫 伤创面的愈合有明显促进作用。 关键词：碱性成纤维细胞生长因子脂质体；间接ELISA 法； 烫伤愈合 I ABSTRACT AIM: In order to get some references for the development of bFGF liposome, we studied the bFGF liposome, its physical chemistry characters and the pharmacodynamic actions of promoting the rats burn wound healing. METHOD: A highly sensitive and repeatable indirect ELISA method was developed and used to quantify the encapsulation efficiency of bFGF liposome. In order to obtain the optimum formula of bFGF liposome, the methods of single factor tesr, full factor tesr and orthogonal design, different preparation methods, category of PC, media pH values and protectants were stuied. The physical chemistry characters of bFGF liposome was identified by many different ways: bFGF liposome was identified by SDS-polyacrylamide gel electrophoresis method、by people s eyes and by transmission microscopy and so on.. The stability of bFGF liposome was evaluated by heir appearance 、encapsulation efficiency、stabili