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第九章 消毒与灭菌Disinfection and Sterilization 采用多种物理、化学或生物学的方法来抑制或杀死病原微生物。 第一节 物理消毒灭菌法 热力灭菌法 辐射灭菌法 滤过除菌法 超声波灭菌法 干燥与低温抑菌法 1.干热灭菌法（Dry heat） 一般细菌繁殖体在干燥状态下80~100℃ 1小时，芽胞160~170 ℃ 2小时。 焚烧 烧灼 干烤 红外线 二、辐射杀菌法（Radiation） （一）紫外线：波长265～266nm 杀菌原理：主要作用于细菌DNA，使相邻两个胸腺嘧啶共价结合形成二聚体，从而干扰DNA复制和转录，导致细菌变异和死亡。 用途与缺陷：穿透力弱 ，只能用于手术室、传染病房、细菌实验室的空气消毒和不耐热的物品表面消毒。 （二）电离辐射：包括x射线和γ射线，有较高的能量与穿透力。用于食品、一次性医用塑料制品的消毒。 （三）微波：可穿透玻璃、塑料薄膜和陶瓷等介质，但不能穿透金属。常用于非金属器械消毒，实验室用品、食品餐具、药杯等消毒。 三、过滤除菌法 是用物理阻留的方法除去液体和气体的微生物。 主要适合于不耐高温的血清、抗生素、抗毒素、药液以及空气除菌。 不能去除病毒、支原体、衣原体等。 滤菌器 四、超声波杀菌法 目前主要用于粉碎细胞，以提取细胞组分或制备抗原等。 五、干燥与低温抑菌法 干燥法常用于保存食物 低温可使细菌的新陈代谢减慢，故常用作保存细菌菌种，冷冻真空干燥法是目前保存菌种的最好方法。 第二节 化学消毒灭菌法 一、消毒剂的主要种类 根据杀灭微生物作用的能力 根据杀菌机制 二、消毒剂的应用 1.患者排泄物与分泌物 粪、尿、脓、痰等，多用等量的20%漂白粉、5%石炭酸或2%来苏儿搅拌均匀，作用2h再倾去。厕所、阴沟的消毒多采用生石灰。 2.皮肤（手） 3.粘膜 4.水 5.空气 常用甲醛加热或甲醛混合高锰酸钾熏蒸：甲醛40ml加高锰酸钾30g/m3，熏蒸12～24h。 居室空气消毒可用5-10ml醋酸/m3加等量水加热蒸发。 肝炎病房可用3g/m3过氧乙酸熏蒸90min。 6.食具的消毒 8.温度计 70%～75％酒精浸泡30min。 肝炎者用2%碘酒浸泡5min后用70%酒精脱碘。 第三节 影响消毒灭菌效果的因素 消毒剂的性质、浓度与作用时间 微生物的种类与数量 温度与湿度 酸碱度 有机物 化学拮抗物质 本章主要复习内容 消毒、灭菌等基本概念 各种消毒灭菌方法的应用及常见物品的消毒灭菌方法。 通过加温使得细菌蛋白质变性、氧化、碳化等杀灭微生物 * * 物理消毒灭菌法 化学消毒灭菌法 消毒（ disinfection）杀死物体上病原微生物的方法，并不一定能杀死含芽胞的细菌或非病原微生物。 灭菌（sterilization） 杀死物体上所有微生物（包括病原菌和非病原菌及其芽胞）的方法。 抑菌 （bacteriostasis）抑制细菌生长繁殖的方法 防腐（antisepsis） 防止或抑制体外细菌生长繁殖的方法。 无菌（asepsis） 不存在活菌的意思。 无菌技术是指在进行外科手术或分离、转种及培养时防止其他微生物污染实验材料的操作方法。 基本概念: 一、热力灭菌法 原理 高温 使菌体蛋白质、核酸、酶等凝固或变性失活。 方法 湿热灭菌 干热灭菌 电热干烤箱 巴氏消毒法(pasteurization) 61.1~62.8 ℃30min / 71.7 ℃15~30s,用于牛奶、酒类的消毒. 煮沸法 一般细菌100 ℃5min , 芽孢1~2h，加入2％碳酸钠可用于消毒食具、刀剪、注射器。 流动蒸汽消毒法 100 ℃蒸汽15~30min 芽孢不能全部杀灭。 间歇蒸汽消毒法 100 ℃蒸汽15~30min,37 ℃过夜,100 ℃蒸汽15~30min，如此连续三次以上.适于不耐高热的含糖、牛奶等培养基。 高压蒸汽消毒法 103.4kPa蒸汽压,121.3 ℃,15~20min，适于培养基、生理盐水、手术敷料等耐高温、耐湿热物品的灭菌。 2. 湿热灭菌法（Moist heat） 手提式高压蒸汽灭菌器 立式高压蒸汽灭菌器 立式智能高压蒸汽灭菌器 干热灭菌与湿热灭菌穿透力的比较 灭菌 完全 10l 10l 101 3 105.3 饱和蒸汽 湿热 灭菌不完全 70以下 72 86 4 130～140 空气 干热 100层 40层 20层 结果 透过布层温度（℃） 加热时间（h） 温度（℃） 传导介质 加热方式 杯式过滤器 圆筒式过滤器 高效消毒剂 ：戊二醛、甲醛 中效消毒剂 ：乙醇、碘伏 低效消毒剂 ：新洁尔灭、洗必泰 促进菌体蛋白质变性或