高效毛细管电泳法在酶反应动力学研究中的应用.pdfVIP

化学通报 2006 年 第69 卷 w018 高效毛细管电泳法在酶反应动力学研究中的应用 * 贾蕊 朱若华 (首都师范大学化学系 北京 100037) 摘 要 毛细管电泳法以其进样量少、操作简便、分辨率高、易于分离和定量、试剂消耗量少、 分析时间短等优点，越来越广泛地应用于酶体系的动力学研究中。本文介绍了近三年来毛细管电泳法 在酶反应动力学研究中的应用，包括酶反应动力学参数的测定、抑制动力学以及蛋白质-药物和蛋白质 -蛋白质络合常数的测定三个部分。 关键词 毛细管电泳 酶 动力学 抑制剂 络合常数 Application of Capillary Electrophoresis Method in the Research of Kinetics of Enzyme Reactions * Jia Rui, Zhu Ruohua (Department of Chemistry, Capital Normal University, Beijing 100037) Abstract Capillary electrophoresis is a convenient tool for studying kinetics of enzymatic system due to many attractive features such as low sample volume, easy to operate, high separation efficiency and resolution, minimal reagent use, and short analysis times. In this paper, the application of capillary electrophoresis method in the research of kinetics of enzyme reactions was introduced in the past three years, including three parts in details: the measurement of kinetic parameters of enzyme reactions, the research of kinetics of inhibitory activities and the determination of binding constant of protein-drug and protein-protein. Key words High performance capillary electrophoresis, Enzyme, Kinetics, Inhibitor, Binding constant 1967 年Hjerten[1]最早提出毛细管电泳技术，并在3mm 内径的管子中使用高场强进行自由溶 液的区带电泳(CZE) 。到了20 世纪80 年代，毛细管电泳技术取得了突破性的进展，Jorgenson 等 [2]用 75μm 的毛细管，采用柱上荧光检测成功分离了氨基酸及多肽物质，获得了40 万的理论塔 板数，并实现了正、负离子的同时分离。近几年来毛细管电泳技术已经成为分析化学中发展最为 迅速的领域之一，它具有快速、高分辨率、高灵敏度和样品用量少、成本低等优点，在生物分析 和生命科学领域中有极为广阔的应用前景。 1995 年以后，毛细管电泳法越来越多的应用于多肽、蛋白质和酶的检测中，特别从1999 年