过氧亚硝基阴离子通过JAKSTAT信号途径促进系膜细胞纤连.pdfVIP

中国细胞生物学学报 Chinese Journal of Cell Biology 2012, 34(3): 272–278 http ://www.cj 过氧亚硝基阴离子通过JAK/STAT信号途径促进 系膜细胞纤连蛋白的合成 1# 2# 3 4 2 1* 王　辉 　刘会英 　赵东杰　王　品　王晓萌　段惠军 1 2 ( 河北医科大学病理教研室, 石家庄050017; 河北医科大学第三医院病理科, 石家庄050051; 3河北省唐山市第三医院外五科, 唐山063100; 4河北现代女子医院妇产科, 石家庄050000) 摘要 氧化应激是糖尿病肾病的重要发病机制之一。过氧亚硝基阴离子(peroxynitrite, ONOO–)是参与氧化应激损伤的重要成员, 与糖尿病及其并发症密切相关。该文观察高糖环境下 ONOO–对系膜细胞合成纤连蛋白(fibronectin, FN)的影响, 并探讨其作用机制。实验中, 人肾小球系 膜细胞分为4组: 正常对照组、高糖组、高糖+尿酸组及高糖+AG490组。培养12, 24, 48 h后收集细 胞及其上清液、并提取细胞总蛋白。采用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测细胞上清液中FN 的含量, 采用免疫细胞化学和Western blot检测NT总蛋白(ONOO– 生成的生物标志物) 、p-JAK2及p-STAT3蛋 白的表达。结果显示, 与同期正常组相比, 高糖组NT总蛋白、p-JAK2及p-STAT3的表达及FN含量 明显增高(P0.05), 并且随着时间的延长表达逐渐增多, 以48 h组最为显著; 高糖+尿酸组, NT 、p- JAK2 、p-STAT3及FN较高糖组明显减少(P0.05); 高糖+AG490组, p-JAK2 、p-STAT3及FN较高糖组 明显减少(P0.05), 但NT表达与高糖组差异无统计学意义(P0.05) 。由此可见, 高糖环境下系膜细 胞中存在ONOO– – 的过量表达, ONOO 通过JAK/STAT信号途径促进系膜细胞FN 的合成。 关键词 过氧亚硝基阴离子; 系膜细胞; JAK/STAT; 纤连蛋白; 氧化应激; 硝基酪氨酸; 糖尿 病肾病 糖尿病肾病(diabetic nephropathy, DN)是糖尿病 伤。过氧亚硝基阴离子(peroxynitrite, ONOO–)是参与 患者发生的常见而难治的慢性微血管并发症, 也是 氧化应激反应的重要自由基之一, 近年的研究表明, ONOO– [4] 糖尿病致死、致残的重要原因。研究表明, 糖尿病 与糖尿病及其并发症关系密切 。我们先前 肾病的病变进展与系膜区细胞外基质(extracellular 的动物实验结果证实, ONOO– 的过多生成与糖尿病 matrix ECM)( IV (fibronectin, 肾病的发生发展可能相关[5], 但ONOO–在系膜细胞中 , 如胶原蛋白 、纤连蛋白 FN)) 的聚积密切相关, ECM 的聚积可导致肾小球局 的表达及其对系膜细胞功能的影响尚知之甚少。 灶性或弥漫性硬化[1] 。系膜细胞是肾小球的重要组 本实验应用体外培养的人肾小球系膜细胞(hu- 成成分, 高糖环境下系膜细胞过量合成细胞外基质 man mesangial cell, HMC), 观察高糖刺激下HMC 中 ONOO– 3- (3-nitroty- 是导致细胞外基质聚积、肾小球硬化, 乃至糖尿病 生