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银杏外种皮多糖的研究进展 任 莉 银杏外种皮多糖（Ginkgo biloba exocarp polysaccharides, GBEP）是从银杏的外种皮中提得的活性多糖。由于银杏外种皮多糖在其原产地是废弃品，不仅污染环境也造成资源浪费，所以从中提取出多糖用于医药保健研究能变废为宝，具有广阔的应用前景。 多糖简介及国内外研究概况 GBEP的提取 GBEP成分分析 GBEP分子量含量测定 GBEP的分离纯化 GBEP药理作用 1 多糖简介及国内外研究概况 多糖是自然界中、含量最丰富的生物聚合物，几乎存在于所有的生物中，具有能量储存、结构支持、防御功能和抗原决定性等多方面的生物功能；有些多糖或其衍生物还有多种药理活性，所以近年来多糖成为天然药物研究的一个热点。 关于银杏外种皮多糖（GBEP），国外研究得较少，国内扬州大学医药研究所近十年来一直致力于GBEP的研究与开发，其GBEP的制备技术已获国家发明专利，对GBEP的药理学作用也进行了系统深入的研究。 2 银杏外种皮多糖的提取 工作原理：冷冻过程：一方面是真空系统进行抽真空把一部分水分带走；另一方面是物料受冻时把某些分子中所含水分排到物料的表面冻结。达到冷冻要求后，由加热系统对物料加热干燥，通过抽真空把物料中所含的水分带到冷冻捕集箱结冻，达到物料冷冻干燥的要求。  3 GBEP的成分分析 3.1 GBEP的定性分析 3.1.1理化性质 3.1.2纸层析 3.2 GBEP的定量分析 3.1.1理化性质 GBEP红外光谱图 用硫酸-蒽酮法测定该多糖的总糖含量为89.7%，用斐林-吴宪法测定该多糖的还原糖含量仅为5.1%，从而得出GBEP中多糖含量=总糖含量-还原糖含量＝84.6％。 采用高效液相色谱法（High Performance Liquid Chromatography，HPLC) 法可同时测定GBEP的分子量及含量，本方法灵敏度高，操作简便，重现性好。 采用PL aquagel-OH MIXED（7.5mm×300mm,8μm）色谱柱，示差折光检测器中进行检测，流动相为超纯水，以右旋糖酐（Dextran）标样作标准曲线，同时测定样品中多糖的分子量及其含量，此项研究工作我们正在进行中。 4 GBEP的分离纯化 多糖的分离纯化方法主要有： 1.分级沉淀法 2.季铵盐络合法 3.离子交换层析法 4.制备性区带电泳 目前GBEP的分离和纯化工作还没有人做过，但是如果GBEP要作为一种新药被开发出来，就必须去处其中所含蛋白质、单糖等杂质对多糖药效的干扰。 笔者查阅了其它相关多糖分离纯化的文献，总结如下： 4.1香菇多糖分离纯化技术 用ＢＥＣＭ法脱蛋白的结果表明,杂蛋白的去除率为99.98%。甲醇分级沉淀得三种多糖Ｌ1,Ｌ2,Ｌ3 4.2人工培养蛹虫草多糖的分离纯化 采用Sephadex G100柱色谱法进行了分离纯化,结果分离得到CPS-1、CPS-2、CPS-3 3种多糖。 4.3 芦荟多糖的分离纯化 芦荟多糖经DEAE-C32柱层析分离, Sephadex G100进一步纯化,得AⅠ、AⅡ和ＡⅢ三种芦荟多糖。红外光谱鉴定芦荟多糖主要为吡喃多糖。 4.4灰树花的分离纯化 将灰树花醇析后的多糖粗品经H2O2脱色，Sevag法脱蛋白，透析，DEAE Sepharose Fast Flow柱层析纯化，得到灰树花胞外纯多糖GLP。 推测其结构是具有(1→6)和(1→3)β型葡聚糖。 5 GBEP的药理作用研究 5.1免疫促进作用 5.2抗衰老作用 5.3对恶性肿瘤的影响 5.4抗炎作用 5.1免疫促进作用 机体的免疫功能尤其是T淋巴细胞介导的细胞免疫功能状态与恶性肿瘤的发生及转移有着密切的关系。 资料表明：进行性肿瘤患者的T淋巴细胞数量及功能均低于正常。GBEP腹腔注射和（或）灌胃给药，可促进正常小鼠和荷瘤（皮下接种S180，下同）ICR小鼠特异性体液和细胞免疫功能以及非特异性免疫功能，这对防癌抗癌是有积极意义的。 5.1.1对正常小鼠的免疫促进作用 GBEP可促进刀豆蛋白（ConA）诱导的正常小鼠脾脏T细胞增殖和脂多糖（LPS）诱导的正常小鼠脾脏B细胞增殖，MTT法显示GBEP终浓度100、200ug/ml两个浓度组体外显著促进小鼠T淋巴细胞、B淋巴细胞的增殖；L929细胞作为靶细胞，中性红法显示GBE