低氧预处理对大鼠BMSCs葡萄糖代谢的影响.pdfVIP

1004 Chinese Journal of Reparative and Reconstructive Surgery, August 2011, Vol. 25, No.8 · · • 干细胞与组织工程 • 低氧预处理对大鼠BMSCs 葡萄糖代谢的影响 1 2 2 朱鸿明 陈晓禾 邓力 【摘  要】    目的 观察低氧预处理对BMSCs 葡萄糖代谢的影响，探讨其潜在机制，为干细胞疗法的优化提供理 论依据。  方法 取 1 ～3 日龄SD 大鼠骨髓，采用密度梯度离心法获得BMSCs ，取第4 代细胞用于实验。根据处理方 法不同将细胞分为4 组：A 组采用常氧培养24 h ；B 组以1% 低氧浓度培养24 h ；C 组于低氧预处理前用20 μmol/L 甲氧 雌二醇处理24 h ；D 组于低氧预处理前用50 μmol/L 缺氧诱导因子 1 （hypoxia-inducible factor 1 ，HIF-1 ）特异的siRNA 处 理12 h。采用MTT 法、生化分析仪及实时荧光定量PCR 检测各组BMSCs 活力、葡萄糖代谢以及HIF-1α mRNA 及葡萄 糖转运蛋白 1 （glucose transporter 1 ，Glut-1 ）mRNA 的表达。  结果 MTT 检测示A 、B 、C、D 组吸光度（A ）值分别为 387.67 ± 58.92、322.50 ± 50.60、297.00 ± 53.00 、286.00 ± 41.00 ，各组间差异无统计学意义（P 0.05 ）。与A 组相比，B 组 葡萄糖摄取量和乳酸生成量显著增加（P 0.05 ）；C、D 组略高于A 组，但差异无统计学意义（P 0.05 ），但显著低于B 组， 差异有统计学意义（P 0.05 ）；C、D 组间比较差异无统计学意义（P 0.05 ）。与A 组相比，B 组HIF-1α mRNA 和Glut-1 mRNA 表达均显著上调（P 0.05 ）；C、D 组HIF-1α mRNA 和Glut-1 mRNA 表达较B 组大幅度降低（P 0.05 ），但仍显著 高于A 组（P 0.05 ）；C、D 组间差异无统计学意义（P 0.05 ）。  结论 低氧预处理可上调大鼠BMSCs 的葡萄糖摄取和 代谢能力，其机制涉及HIF-1 mRNA 及其下游基因Glut-1 mRNA 的表达上调。 【关键词】 BMSCs    低氧预处理 缺氧诱导因子 1 葡萄糖转运蛋白1 大鼠 EFFECTS OF HYPOXIC PRECONDITIONING ON GLUCOSE METABOLISM OF RAT BONE MARROW 1 2 2 1 2 MESENCHYMAL STEM CELLS/ZHU Hongming , CHEN Xiaohe , DENG Li . State Key Laboratory of Biotherapy, Division of Stem Cell and Tissue Engineering, Regenerative Medicine Research Center, West China Hospital, Sichuan University, Chengdu Sichuan, 610041, P.R.China. Corresponding author: DENG Li, E-mail: dengli2000@21 【Abstract 】 Objective To study t