制备型硅胶柱层析分离单一聚合度纤维寡糖及其测定.pdfVIP

中国农业科学 2011,44(14):2999-3006 Scientia Agricultura Sinica doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2011.14.017 制备型硅胶柱层析分离单一聚合度纤维寡糖及其测定 1 1 1 1 2 刘程程 ，石 波 ，姚喜梅 ，梁 平 ，李静梅 1 2 ( 中国农业科学院饲料研究所，北京 100081； 中国农业科学院作物科学研究所，北京 100081) 摘要：【目的】探索实验室低成本、规模化制备单一聚合度纤维寡糖的方法，并得到聚合度分别为2—5 纯度 较高的单一组分纤维寡糖。【方法】采用制备型常压硅胶柱层析（ø22 mm×900 mm），选择干法填柱、干法上样对 混酸降解法制备得到的纤维寡糖进行分离纯化。采用薄层色谱法（TLC）对分离过程进行监测，用荧光辅助糖电泳 （FACE）对分离后的各单一组分进行定性检测，并用电喷雾-飞行时间质谱（ESI-TOF-MS）对各单一组分进行分子 质量的确认。【结果】采用制备型常压硅胶柱层析法对于聚合度在 2—5 的纤维寡糖具有很好的分离效果。 ESI-TOF-MS 法检测本试验得到的4 种单一聚合度纤维寡糖分子质量（钠离子峰）分别为365、527、689 和851， 分别对应纤维二糖、纤维三糖、纤维四糖和纤维五糖的分子质量。本试验一次上样300 mg 纤维寡糖混合物，可分 别获得28 mg 纤维二糖、43 mg 纤维三糖、59 mg 纤维四糖和52 mg 纤维五糖。荧光辅助糖电泳（FACE）能非常灵 敏地定性检测纤维寡糖。【结论】制备型常压硅胶柱层析能较好地分离纤维寡糖，得到聚合度分别在2—5 的单一 组分纤维寡糖。 关键词：单一聚合度纤维寡糖；硅胶柱层析；分离纯化；荧光辅助糖电泳（FACE）；电喷雾飞行时间质谱 （ESI-TOF-MS） Separation and Detection of Mono-Cellooligosaccharide Purified by Preparative Silica Column Chromatography 1 1 1 1 2 LIU Cheng-cheng , SHI Bo , YAO Xi-mei , LIANG Ping , LI Jing-mei 1 2 ( Feed Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100081 ; Institute of Crop Science, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100081) Abstract: 【Objective 】The aim of this paper was to explore a simple method to get sizeable amount of mono- cellooligosaccharide with degrees of polymerization （DP ）two to DP five. 【Method 】The preparative silica column c