紫外诱变原生质体选育溶茵酶高产菌株的研究.pdfVIP

第 3O卷 第 4期 渔 业 科 学 进 展 Vo1．30，NO．4 2 0 0 9 年 8月 PROGRESSIN FISHERY SCIENCES Aug．，2009 紫外诱变原生质体选育溶茵酶高产菌株的研究 冯学珍 郑 媛 王跃军 孙 谧 ¨ 于建生 程江峰。 (中国水产科学研究院黄海水产研究所 ，青岛266071) (。青岛科技大学化工学院，266042) (。柳州医学高等专科学校药学教研室，545006) 摘要 以1株产海洋溶菌酶活性较高的菌株 (S_12—86)为原始菌株 ，对其原生质体的制备 、再生及 紫外诱变育种进行 了研究。实验所确定的原生质体的最佳制备条件为：菌株 S一12—86培养 18h，溶茵 酶浓度为 1．0mg／ml，在 35℃下，酶解 30min，原生质体形成率为97．6 ，再生率为23．6 。同时实 验所确定的原生质体诱变的适宜条件为：30w 紫外灯下 80crn照射 120S。对大量再生突变株进行 筛选，最终获得 了1株遗传 性能稳定 的菌株 R—J一101，其产酶活力达到 1808U／mg，比原始菌株 (1290U／mg)提高 了4O 。 关键词 海洋溶菌酶 原生质体的制备和再生 芽孢杆菌 诱变 中图分类号 Q557 文献识别码 A 文章编号 1000—7075(2009)04—0090—06 Breedingofahigh lysozymeproducingBacillusstrain bymutagenesisofprotoplasts FENGXue—zhen， ZHENGYuan WANGYue-jun SUNMi YU Jian—sheng CHENG Jiang—feng (Yellow SeaFisheriesResearchInstitute，ChineseAcademyofFisherySciences．Qingdao266071) (CollegeofChemicalEngineeringQingdaoUniversityofScienceandTechnology，266042) (。PharmicDepartmentLiuzhouMedicalCollege，545006) ABSTRACT Thepreparation，regenerationandUV-mutagenesisofprotoplastsofstrainS-12—86， whichhadhighlysozyme-producingactivity，werestudied ． Theresultsshowedthattheoptimalcondi— tionsofthepreparationandregenerationofprotoplastwereasfollows：incubationtimeofthestrainS- 12—86was18h，concentrationsoflysozymewas1．0mg／ml，andtimeofenzymolysiswas3Ominat 35oC．Theratesofformationandregenerationofprotoplastundertheoptimalconditionswere97 ． 6 and23．6 ，respectively．Th