微波技术用于腐败生物组织中吗啡的检测研究.pdfVIP

∗ 微波技术用于腐败生物组织中吗啡的检测研究 刘克林 张春水 周淑光 白燕平 公安部物证鉴定中心 北京 100038 沈伟峰 李文君 中国人民公安大学 北京 100038 ［摘要］ 本文采用微波酸水解和微波酶水解的方法，建立了一套检测腐败生物组织中吗啡的方法。 与传统的水浴加热水解相比较，微波水解大大缩短了水解时间，能够使吗啡与蛋白充分解离。该方 法具有快速，灵敏度、精确度和准确度高的特点，适合大批量腐败生物检材的标准化分析测定，并 成功应用于一些案例的检测工作，取得了良好的效果。 ［关键词］ 微波酸水解 微波酶水解 腐败生物组织 吗啡 1 前言 海洛因是当今国际上吸、贩毒中最为常见的毒品之一。近几年来，我国吸食海洛因导致的中毒 死亡案件逐年增多，国内外对于这类死亡者体液中的海洛因及其代谢产物吗啡的检测以及其在体内 的分布研究已有很多的报道。但是对于腐败生物组织中吗啡的检测却报道甚少，并且在实际检验中， 此类案件检材中毒品成分含量少、杂质干扰大、回收率低，检验存在很大的难度。本文将微波技术 应用于腐败生物组织中毒品成分吗啡的检验研究，取得了预期的效果。 2 实验部分 2.1 仪器与试剂 CEM 生产的MARS 5微波控制系统，配备14个高压微波罐，最高温度260℃，最大压力500psig； 岛津QP-5050A 气质联用仪，J＆W DB-5MS(30m×0.25mm×0.25um)毛细柱； PE AutoSystem XL气相色谱仪，J＆W DB-5MS(30m×0.25mm×0.25um)毛细柱，NPD检测器。 标准样品溶液：取吗啡、氘代吗啡、O6-单乙酰吗啡、可待因、海洛因等纯品，分别用无水乙 醇配成1mg/ml的标准样品溶液。 ∗国 家 “ 九 五 ” 科 技 攻 关 项 目 中 的 部 分 研 究 工 作 1 缓冲液：分别配制PH 为3，5，7，9的缓冲液。 衍生化试剂：MSTFA［N-甲基-(三甲基硅烷基)-三氟乙酰胺］，置于密封瓶中，贮于4℃的冰箱 内备用。 酶制剂：复合风味蛋白酶，置于密封瓶中，贮于4℃的冰箱内备用。 溶剂：甲醇、乙醇、乙酸乙酯、氯仿、异丙醇等均为分析纯；用去离子水分别配制 2M、4M、 6MHCL溶液。 固相柱：HLB、MCX（购自WATERS公司，规格300mg/3ml）。 2.2 仪器操作条件 2.2.1 微波操作条件 微波酸水解条件：5分钟内升温至120℃，保持15分钟。 微波酶水解条件： 5分钟内升温至50℃，保持25 分钟。 2.2.2 GC 和 GC/MS 操作条件 GC 条件：柱温 230℃，保持 1 分钟，每分钟 10℃升至 280℃，保持 10 分钟；进样口温度 260 ℃，检测器温度280℃，分流比为20：1。 GC/MS 条件：柱温 200℃，保持 1 分钟，每分钟 20℃升至 280℃，保持 10 分钟；进样口温度 260℃，接口温度230℃；载气（氦气）压力128KPa；分流比为20：1； EI离子源，电子能量70eV， 离子源温度180℃；扫描质量范围50～500amu。 2.3 分析步骤 2.3.1 腐败生物组织的收集与制备 称取 3 克案件收缴海洛因（含量约为 60%），溶于 1000ml 的新鲜牛奶中，一头约 50 公斤的小 牛服用一小时后死亡。解剖提取牛肝组织置于大烧杯中，用塑料布封好，通风橱中自然腐败。三年 后，取高度腐败的牛肝组织备检。 2.3.2 微波酸水解的步骤 准确称取1克检材肝组织，置于微波水解罐中，加入10ml 2M的HCl 溶液，盖好密闭活塞，在 微波控制系统中水解20分钟。 2.3.3 微波