不同浓度Avastin对角膜新生血管抑制作用的实验研究.pdfVIP

摘 要 角膜新生血管(corneal neovascularization , CNV) 可导致眼部组织结构的破坏和 视功能的损害,是致盲的主要原因之一。实验证实，血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor ，VEGF）在角膜新生血管形成过程中起重要作用。近年来，已有报道Avastin 对角膜新生血管有抑制作用，显示了它的临床应用前景，但是，Avastin 治疗角膜新生血 管最佳有效浓度尚未确定。本实验观察三种浓度的Avastin 对大鼠角膜碱烧伤诱导的新生 血管的抑制作用，为临床给药方案提供相关实验依据。 第一部分 不同浓度Avastin 抑制大鼠角膜新生血管的动态观察 目的 观察不同浓度avastin对碱烧伤诱导的角膜新生血管的影响，探求avastin的最佳用 药浓度。 方法 采用碱烧伤的方法制备大鼠角膜新生血管模型。模型制作后随机分为对照组、实验 1组、实验2组和实验3组，每组15只大鼠。对照组：碱烧伤后立即和烧伤后第7d在球结膜 下注射各0.05ml生理盐水。实验1组：球结膜下注射avastin 0.05ml （2.5mg/ml）；实验2 组：球结膜下注射avastin 0.05ml （12.5mg/ml）；实验3组：球结膜下注射avastin 0.05ml （25mg/ml）；各实验组分别于碱烧伤后立即和在烧伤后第7d球结膜下注射等量相应不同 浓度avastin 。观察各组角膜新生血管的生长情况并比较碱烧伤后第7d，14d，28d各组角 膜新生血管面积的区别。碱烧伤后第7d，14d，28d各组分别取5只大鼠角膜进行HE染色， 光镜观察。 结果 第7d、14d、28d各实验组的角膜新生血管面积均明显小于对照组，差异均有统计学 意义（P0.05），实验2组、实验3组均小于实验1组，差异均有统计学意义 (P0.05)；实 验2组、实验3组CNV面积在不同时刻点无显著差异(P 0. 05)。 结论 2.5mg/ml、12.5 mg/ml、25 mg/ml三种浓度中以12.5mg/ml avastin对碱烧伤角膜 新生血管抑制作用较好，avastin球结膜下注射后全身及局部未发现毒副作用。 第二部分 不同浓度Avastin 对大鼠角膜VEGF 表达的影响 目的 观察 avastin 对碱烧伤后角膜VEGF 表达的影响，探讨 avastin 抑制新生血管的机 制。 I 方法 采用碱烧伤的方法制备大鼠角膜新生血管模型。模型制作后随机分为对照组、实验 1 组、实验2 组和实验3 组, 每组 15 只大鼠。对照组：碱烧伤后立即和在烧伤后第7d 球 结膜下注射0.05ml 生理盐水。实验 1 组：球结膜下注射avastin 0.05ml （2.5mg/ml）； 实验2 组：球结膜下注射avastin 0.05ml （12.5mg/ml）；实验3 组：球结膜下注射avastin 0.05ml （25mg/ml）；各实验组分别于碱烧伤后立即和在烧伤后第7d 球结膜下注射等量相 应浓度avastin。碱烧伤后第7d，14d，28d 观察完毕后各组分别取5 只大鼠角膜，行免疫 组化检测角膜VEGF 的表达。比较碱烧伤后第7d，14d，28d 各组角膜VEGF 阳性表达率的 区别。 结果 角膜碱烧伤后第7d、14d、28 d， 实验1、2、3 组与对照组角膜组织中 VEGF 表达 的阳性率均存在显著性差异,对照组阳性表达率较高(P0.05) ,各时间点实验 1 组的VEGF 阳性表达率高于实验2 和实验3 组（P0.05），而实验2 组和实验3 组VEGF 表达无明显 差异（P0.05）。 结论 碱烧伤后角膜新生血管的形成与VEGF 密切相关，avastin 对碱烧伤角膜VEGF 的表 达有明显地抑制作用。2.5mg/ml、12.5 mg/ml、25 mg/ml 三种浓度中以12.5mg/mlavastin 对碱烧伤角膜VEGF 抑制作用较好。 关键词 avastin；角膜；新生血管；VEGF II Abstract Corneal neovascularization(CNV) resulting in the structure of the eye and functio