《光合色素的提取和分离》实验解读.docVIP

《光合色素的提取和分离》实验解读 舟山中学 杨重云 一、实验原理 1色素提取原理：色素溶于有机溶剂而不溶于水，可用95%的乙醇、丙酮等有机溶剂来溶解色素，从而提取绿叶中的色素。色素提取也可用水浴加热法，即把叶片剪碎后放在95%的乙醇中，进行隔水加热来提取。一般地说，叶片加热到变成黄白色，叶片中的色素基本上被提取出来了。 色素分离原理：各种色素在层析液中溶解度不同，溶解度高的随层析液在滤纸上扩散速度比较快，反之则比较慢，从而使各种色素相互分离开来。 、实验中几种化学药品的作用 化学药品 作用 95%的乙醇 溶解色素，提取色素 层析液 分离绿叶中的色素 二氧化硅 增加杵棒与研钵间的摩擦力，破坏细胞结构，使研磨充分 碳酸钙 防止研磨过程中色素被破坏 、实验流程 选取材料→提取色素→制备滤纸条→点样→色素分离→观察结果、实验结果及分析 1从色素带的宽度可推知色素含量的多少依次为：叶绿素a叶绿素b叶黄素胡萝卜素。 2从色素带的位置可推知色素在层析液中的溶解度大小依次为：胡萝卜素叶黄素叶绿素a叶绿素b。 3在滤纸条上距离最近的相邻两条色素带是叶绿素a与叶绿素b，距离最远的相邻两条色素带是胡萝卜素与叶黄素。、实验中的注意事项 1选材：选取鲜嫩深绿的叶片，以保证含有较多的色素2．提取色素：研磨要迅速、充分，以保证提取较多的色素。 3点样：用力要均匀，快慢要适中。滤液细线要细、直，且干燥后重复画3～4次，使滤液细线既有较多的色素，又使各色素扩散的起点相同。 4色素分离：滤纸上的滤液细线要高于层析液液面，不要触及层析液，以防色素溶解到层析液中，滤纸条上得不到色素带。 5实验安全：本实验需接触层析液等有害物质，实验结束后一定要用肥皂将手洗净。 、实验成功的关键 1选取的叶片要新鲜、颜色要深绿，以保证含有较多的色素。 2研磨要迅速、充分。叶绿素不稳定，易被活细胞内的叶绿素酶水解，因此要加碳酸钙，以防止色素被破坏。乙醇容易挥发，所以研磨要迅速。充分研磨使叶绿体完全破裂，从而提取较多的色素。 3滤液细线不仅要求细、直，而且要求含有较多的色素，所以要求待滤液干后再画2～3次。 4滤液细线不能触及层析液，否则色素溶解到层析液中，滤纸条上得不到色素带。 、色素提取液呈淡绿色的原因分析 1选取材料不合适，色素含量较少。 2研磨不充分，色素未能充分提取出来。 3称取绿叶过少或加入乙醇过多，色素溶液浓度过低。 4未加碳酸钙或加入过少，色素分子部分被破坏。 例1、下列有关“叶绿体色素的提取和分离”实验的叙述正确的是（） A．加入碳酸钙防止滤液挥发 B．用无水酒精或丙酮分离滤液中的色素 C．用NaCl溶液提取叶片中的色素 　　D．加入二氧化硅（石英砂）有利于充分研磨 解析：加入碳酸钙是为了防止色素被破坏，分离色素用层析液，提取色素用乙醇或丙酮等有机溶剂。 答案：D 例2、从高等植物叶片中分离出4种光合色素，其中呈橙黄色的是（　　） A．叶绿素a B．叶绿素b C．胡萝卜素 D．叶黄素 解析：本题考查叶绿体色素的种类，胡萝卜素橙黄色叶黄素黄色叶绿素a蓝绿色叶绿素b黄绿色。答案：C例3、在叶绿体色素的提取和分离实验中，收集到的滤液绿色过浅，其原因可能是（ ） ①未加石英砂、研磨不充分 ②一次加入大量的无水酒精提取 ③分次加入少量无水酒精提取 ④使用放置数天的菠菜叶 A．①②③ B．②③④ C．①③④ D．①②④ 石英砂使研磨充分无水酒精溶解色素，提取色素加入大量的无水酒精放置数天的菠菜叶答案：D 例、“叶绿体色素提取和分离”实验（1）甲同学利用新鲜的玉米绿色叶片进行“叶绿体色素提取和分离”实验，在滤纸上出现了四条清晰的色素带，其中呈黄绿色的色素带为 。 （2）该同学改变层析液组成后继续进行实验，滤纸条上只出现了黄、绿两条色素带。他用刀片裁出带有色素带的滤纸条，用乙醚分别溶解条带上的色素，浓缩后用一分析仪器检测，通过分析色素溶液的 来判断条带的色素种类。 （3）实验结束几天后，乙、丙两同学发现部分预留叶片已变黄。乙同学认为这是由于叶片中某些色素降解所造成的，丙同学则认为某些色素含量增加。根据所学知识，你将如何设计实验来判断两个同学的观点是否正确？　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 解析：要判断叶片变黄是由于某些色素分解还是某些色素增加造成的，可通过变黄叶片与未变黄叶片的色素提取分离的结果作对照，比较两组色素的组成及含量即可。 答案：（1）叶绿素b　　（2）吸收光谱　　（3）从预留的叶片中挑选出足量的、份量相等、大小相近的已变黄的叶片和尚未变黄的叶片为实验材料，在相同条件下，再次进行叶绿体色素的提取分离实验，测定和记录实验结果，比较