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固相微萃取技术在呼出气测定中的应用 单位：哈尔滨医科大学附属第一医院 邮编：150001 姓名：刘德胜 电话固相微萃取（solid-phase microextraction，SPME)是1989 年由加拿大 Pawliszyn 等人提出[1]，是一种无溶剂样品预处理技术。它集采样、富集和进样于一体[2], 为样品预处理开辟了一个全新的局面。SPME-气相色谱联合广泛用于大气、水、土壤、食品、药品、生物材料中挥发、半挥发性有机物的分析，该方法具有操作简单、不使用有机溶剂、样品需要量少、萃取效率高、经济、准确、灵敏度高﹑重现性好、适用面广、分析速度快等优点。SPME-气相色谱-质谱联用可用于多种物质的定性定量分析。 一、固相微萃取装置 将涂有高分子涂层的熔融石英纤维用耐高温的环氧树酯固定在纤维连接管上, 压杆卡持螺钉可通过Z型槽使石英纤维在注射针管内伸出或收入, 注射针管对石英纤维起保护作用。石英纤维根据其涂层的不同分为三类: 极性涂层、中性涂层和非极性涂层, 可根据所测定的目标分析物进行选取, 每根纤维正常测定寿命可达 100 次左右。 1- 压杆　2、筒体　3- 压杆卡持螺钉　4- Z 型槽　5- 筒体视窗　6、调节针头长度的定位器　7- 拉伸弹簧　8- 密封隔膜　9- 注射针管　10- 纤维连接管　11- 熔融石英纤维 　 图1.SPME 装置示意图 二 、影响固相微萃取的因素 （一）涂层的性质及厚度 选用何种固定相应当综合考虑分析组分在各相中的分配系数、极性与沸点 ,根据“相似者相溶”的原则,选取最适合分析组分的固定相,常用固定相、适用试样及参考文献见表1。但这并不是绝对的 ,需要在实验中根据所分析的组分具体研究,例如,根据香味组成成分的化学性质使用非极性的聚二甲基硅氧烷(po lydimethylsiloxane,PDMS)和极性的聚丙烯酸酯(polyacrylate,PA),但 Steffen等在对橘子中17种香味进行分析时发现虽然二者效果相近,可PA比PDMS萃取时间长20min,且检测不出β-香叶烯[3]。而 Verhoeven 等却在草莓香味分析中发现PA效果更好[4],Fisher使用PDMS和PA检测由软木塞对酒带来污染物时发现前者比后者的萃取效率高10%[5]。此外,还需考虑石英纤维表面固定相的体积,即石英纤维长度和涂层膜厚,如非特殊定做,一般石英纤维长度为1cm,膜的厚度通常在10～100μm之间,小分子或挥发性物质常用厚膜,大分子或半挥发性物质常用薄膜,综合考虑试样的挥发性还可选择中等厚度,如Field在检测啤酒花中香精油时发现使用PDMS100μm比30μm膜厚萃取效率要高10～20倍[6],Young在使用 PDMS20μm、30μm、100μm检测有机氯农药中得出30μm效果最好的结论[7]。 表1 　常用固定相和适用范围 Table 1:The kinds of solid and using 固定相类型 极性 适用试样 PDMS (聚二甲基硅氧烷) 非极性 有机氯、有机磷、有机氮农药[8~13]；药品和麻醉品 [14~15]；食物中的咖啡因[16]；挥发物[17]；卤化物[18]； PA (聚丙烯酸酯) 极性 　有机氮农药[19]； 脂肪酸[20,21]；药物[22]； 食品中香味[23,24]；酚[25] 聚乙二醇/二乙烯基苯 极性 体液中乙醇[26] （二）试样量、容器体积　 由于固相微萃取是一个固定的萃取过程 ,为保证萃取的效果需要对试样量 ,试样容器的体积进行选择,Denis在利用顶空法检测 14 种半挥发性有机氯农药的研究中指出,试样量与试样容器的体积对于保证结果有很大关系,试样量与试样容器体积之间存在有匹配关系,试样量增大的情况下,重现性明显变好,检出量提高[27]。 （三）萃取时间的影响 萃取时间是从萃取头与试样接触到吸附平衡所需要的时间。为保证试验结果重现性良好,应在试验中保持萃取时间一定。影响萃取时间的因素很多,例如分配系数、试样的扩散速度、试样量、容器体积、试样本身基质、温度等。在萃取初始阶段,分析组分很容易且很快富集到石英纤维固定相中,随着时间的延长,富集的速度越来越慢,接近平衡状态时即使时间延长对富集也没有意义了,因此在摸索实验方法时必须做富集—时间曲线,从曲线上找出最佳萃取时间点,即曲线接近平缓的最短时间。一般萃取时间在5～60min以内,但也有特殊情况。 （四）萃取温度的影响 萃取温度是影响分析速度的一个重要因素。温度升高, 分析物扩散速度增大, 加