人体药代动力学、生物利用度和生物等效性研究.pptVIP

临床药代动力学、生物利用度和生物等效性研究 临床药代动力学（PK）研究 研究药物在人体内处置的过程（吸收、分布、代谢和排泄）， 是临床制定合理用药方案和个体化药物治疗的依据。 生物利用度（BA） 是指药物或药物活性成分吸收进入全身循环的程度和速度。一般分为绝对生物利用度和相对生物利用度。 生物等效性（BE） 是指药学等效制剂或可替换药物在相同试验条件下，服用相同 剂量，其活性成分吸收程度和速度的差异无统计学意义。通常 意义的生物等效性研究是指用生物利用度研究的方法以药代动 力学参数为终点指标，根据预先确定的等效标准和限度进行比 较研究。 PK、BA和BE研究常用的分析方法 色谱法：气相色谱法（GC）、高效液相色谱法（HPLC）、色谱-质谱联用法（LC-MS、LC-MS-MS、GC-MS、GC-MS-MS）。用于大多数药物检测。 免疫法：放射免疫分析法、酶免疫分析法、荧光免疫分析法等。多用于蛋白质多肽类物质检测。 微生物学方法：可用于抗生素药物的测定。 方法学确证 1. 特异性 特异性系指在样品中存在干扰成分的情况下，分析方法能够准 确、专一地测定分析物的能力。 要求： 必须证明所测定物质是受试药品的原形药或特定的代谢物；生物样品所含内源性物质不得干扰样品的测定。如果有几个分析物，应保证每个分析物都不被干扰。 应确定保证分析方法特异性的最佳条件。 色谱法至少要考察6个不同来源空白生物样品色谱图、空白生物样品外加对照物质色谱图（注明浓度）及用药后的生物样品色谱图，来反映分析方法的特异性。 对于质谱法，则应注意考察分析过程中的介质效应。 方法学确证 2. 标准曲线和定量范围 标准曲线反映所测定物质浓度与仪器响应值的关系，一般用回归方程来评价。 要求： 1）提供标准曲线的线性方程和相关系数，说明其线性相关程度。 2）标准样品是在相同生物介质中加入已知量的分析物配制而成，必须至少采用6个浓度的标准样品，建立标准曲线。对于非线性相关可能需要更多浓度点。 方法学确证 2. 标准曲线和定量范围 要求： 3） 在定量范围（即标准曲线高低浓度范围）内浓度测定结果应达到试验要求的精密度和准确度。 4）定量范围要能覆盖全部待测的生物样品药物浓度范围，不得用定量范围外推方法求算药物浓度。 5）建立标准曲线时应随行空白生物样品，用于评价干扰。 方法学确证 3. 定量下限（LLOQ） 定量下限是标准曲线上的最低浓度点，表示测定样品中符合准确度和精密度要求的最低药物浓度。 要求： 1）定量下限应能测定3~5个消除半衰期时样品中的药物浓度，或Cmax的1/10~1/20的药物浓度。 2）定量下限的准确度应在真实浓度的80~120%范围内，相对标准差（RSD）应小于20%。 方法学确证 4. 精密度和准确度 1）精密度是指在确定的分析条件下，相同介质中相同浓度样品的一系列测定值的分散程度。 通常用质控样品RSD考察方法的精密度。一般RSD应小于15%，在LLOQ附近的RSD应小于20%。 2）准确度是指在确定的分析条件下，测得的生物样品浓度与真实浓度的接近程度（即质控样品的实测浓度与真实浓度的偏差）。一般应在85%~115%范围内（偏差应小于15%），在LLOQ附近应在80%~120%范围内。 方法学确证 4. 精密度和准确度 3）一般要求选择高、中、低3个浓度的质控样品同时进行精密度和准确度考察。低浓度通常在LLOQ的3倍以内，高浓度接近标准曲线上限，并在中间选一个浓度。 测定批内精密度，每一浓度至少测定5个样品；批间精密度应至少连续测定3个分析批（45个样品）。 方法学确证 5. 样品稳定性 根据具体情况，对含药生物样品在室温、冰冻和冻融条件 下，以及不同存放时间进行稳定性考察，以确定生物样品的存 放条件和时间。要注意考察储备液的以及样品处理后溶液中分 析物的稳定性，以保证检测结果的准确性和重现性。 6. 提取回收率 分析过程的提取效率，以样品提取和处理过程前后分析物 含量百分比表示。 应考察高、中、低3个浓度的提取回收率， 其结果应当一致、精密和可重现。 方法学确证 7. 微生物学和免疫学方法的确证 上述很多参数和原则也适用于微生物学和免疫学方法， 但应考虑它们的特殊之处。微生物学和免疫学分析的标 准曲线本质上是非线性的，应采用更多的浓度点来建立 标准曲线。 方法确证实验应包括在几天内进行的6个分析批，每个 分析批包括4个浓度（LLOQ、低、中、高浓度）的质控 双样本。 生物样品测定和质量控制 在测定生物样品中的药物浓度时应进行质量控 制，以保证所建立方法的实际应用可靠性。 质量控制： 1）整个生物样本分析过程应遵从预先制定的实验室SOP以及GLP原则。 2）建议由