三七皂苷R1对过氧化氢诱导大鼠星形胶质细胞凋亡的影响.pdfVIP

·7048 · 中华临床医师杂志( 电子版)2013 年8 月第7 卷第15 期 Chin J Clinicians(Electronic Edition),August 1,2013,Vol.7,No.15 ·基础论著· 三七皂苷 R1 对过氧化氢诱导大鼠星形胶质 细胞凋亡的影响 张鑫 林永文 郑爱华 黄义平 张振华 【摘要】 目的 探讨三七皂苷R1 保护大鼠皮质星形胶质细胞免于过氧化氢诱导的凋亡作用及相关分 子机制。方法 利用200 μmol/L 过氧化氢处理胶质细胞24 h 建立凋亡模型，加入10 μmol/L、50 μmol/L 及 100 μmol/L 三七皂苷 R1 预处理胶质细胞 24 h 后与 200 μmol/L 过氧化氢共同作用 24 h ，通过Annexin V-FITC/PI 双染法流式细胞分析仪检测各组凋亡率和检测Caspase-3 的活性水平。利用实时定量RT-PCR 与 Western blot 检测BAX 与BCL2 的mRNA 水平和蛋白表达量，并检测各组的STAT3 蛋白表达量及其Y705 位点 的磷酸化水平。结果 过氧化氢诱导凋亡24 h 后，对照组胶质细胞凋亡率及Caspase-3 活性上升，加三七皂 苷 R1 处理后凋亡率及 Caspase-3 活性下降，其中 50 μmol/L 浓度组与 100 μmol/L 浓度组的凋亡率与 Caspase-3 活性与对照组差异显著 （P0.05 ）。相对于对照组，加入三七皂苷R1 处理后BAX 基因的mRNA 及蛋白表达水平降低，BCL2 基因的mRNA 及蛋白表达水平上升。STAT3 蛋白表达量在经过氧化氢处理后 蛋白表达无变化，其Y705 位点的磷酸化水平明显上升，加入三七皂苷R1 处理后STAT3 蛋白表达量及磷酸化 水平无显著变化。结论 三七皂苷R1 能通过恢复凋亡相关基因BAX 与BCL2 的平衡，保护大鼠皮质星形 胶质细胞免于过氧化氢诱导的凋亡作用，但其相关机制可能与STAT3 信号通路无关。 【关键词】 皂苷类； 星形细胞； 细胞凋亡 * Protective effect of ginsenoside Rg1 on rat astrocytes apoptosis ZHANG X in , LIN Yong-wen, ZHENG Ai-hua, * H UANG Yi-ping, ZHANG Zhen-hua. Key Laboratory for Medical Molecular Diagnostics of Guangdong Province, Guangdong Medical College, Dongguan 523808, China Corresponding author: ZHANG Zhen-hua, Email: gdynkf@163.com 【Abstract 】 Objective To investigate the effect of notoginsenoside R1(NTR1) preventing astrocytes from H O induced apoptosis, and the related mechanism. Methods Primary cultured astrocytes were exposed 2 2 to 200 μmol/L H2O2 for 24 h for inducing apoptosis, and the NTR1 was added into the culture medium before the H O of 24 h. The rate of apoptosis was assayed by Annexin V-FITC/PI staining and flow cytometry analysis, and 2 2 the Caspa