披针叶黄华生物碱的提取及对鼠的急性毒理试验.pdfVIP

披针叶黄华生物碱的提取及对鼠的急性毒理试验.pdf

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披针叶黄华生物碱的提取及对小鼠的急性毒理试验 李勇 何生虎 张永康 (宁夏大学农学院动物科学系,宁夏银川,750021 ) 摘 要:披针叶黄华(Thermopsis lanceolate)别名“牧马豆”是豆科野决明属植物。牧马豆是有毒植,可引起 牲畜中毒。但也是药用植物,具有兴奋呼吸,抗辐射及去痰止咳等功效。采用醇类溶剂提取法从披针叶黄 华中得到总生物碱进行了急性毒性试验,其对小鼠腹腔注射的半数致死量 LD50 为 94.83 mg/kg 。 关键词:披针叶黄华;总生物碱;急性毒性试验 披针叶黄华(Thermopsis lanceolate )别名叫牧马豆或土马豆,属豆科(leguminoseae ) 野决明属(Thermopsis )植物,为多年生草本植物。分布于东北、华北、内蒙古、陕西、甘 肃、宁夏、青海、新疆、四川等省区,俄罗斯、蒙古也有分布。同属植物全世界约有 30 种, 我国有 8 种及 3 变种,常见的还有高山黄华(T.alpina ledeb ),紫花黄华(T.barbata Benth ), 小叶野决明(T.chinensis Benth)和野决明(T.lupindides),其中高山黄华、紫花黄华和野决明为 有毒植物,全草有毒,为牧场常见有毒植物,种子易混入谷物引起人和牲畜的中毒。产生神 经系统的兴奋和气管刺激症状[1] [2] [6] [7] 。本实验利用对披针叶黄华生物碱的提取进行的急性 毒性试验,为披针叶黄华中毒病的防治提供了一定的理论依据。 1 材料 1.1 材料 1.1.1 主要仪器 AR1140 电子天平,美国制造;回流装置,减压蒸馏装置;2XZ-2 旋片式真 空泵(浙江黄岩求精真空泵厂生产);RE52-05 型旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂);Db-2 型不锈钢电热板(苏州威尔实验用品有限公司)。 1.1.2 实验药物与试剂 披针叶黄华采自宁夏盐池县,洗净、晒干、粉碎后备用。95% 乙醇 液,1mol/L 的盐酸溶液,甲醇液、氯仿、氢氧化钠、氨水、冰醋酸、次硝酸铋、碘化钾、 灭菌注射用水(石家庄四药有限公司)。所用试剂和药品均为国产分析纯和 AR 级。 1.1.3 试验动物 ICR 小鼠 100 只,体重 18—24g ,雌雄各半,购于宁夏医学院实验动物中 心,实验动物均于室温下自由饮水采食,所喂饲料为全价饲料。 2 方法 2.1 披针叶黄华生物碱的提取 准确称取披针叶黄华干燥粉末 800 克,,以 95%乙醇热提, 提出液减压回收乙醇,剩余物以 1% 盐酸水溶液反复处理至残渣中检测不到生物碱。酸水 液以浓氨水碱化至 pH=9-10 ,以氯仿萃取至水液中检测不到生物碱,减压回收氯仿后得粗生 物碱。取少量生物碱观察其形状、颜色、水溶性,并用改良碘化铋钾试剂、碘化汞钾试剂等 做显色实验,以判断是否含有生物碱。 图为披针叶黄华总生物碱提取流程[3] [4] [5] 披针叶黄华干草粉 ↓ 甲醇热提次 甲醇液 ↓ 减压回收溶剂 浸 膏 ↓ 挥发到恒重,称重,1N HCL 溶解过滤 ┎────────┓ 酸水液 残渣(弃去) ↓氯仿萃取数次 ┏────────┓ 氯仿层(弃去) 酸水液 ↓NaOH 碱化至 pH9-11 ,氯仿萃取数次 ┏──────────┓ 碱水液(弃去) 氯仿液 ↓减压回收溶剂

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