long evans 大鼠视网膜神经节细胞培育与鉴定.pdfVIP

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2017-09-14 发布于山东
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long evans 大鼠视网膜神经节细胞培育与鉴定.pdf

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第 26 卷第 5 期第　三　军　医　大　学　学　报 Vol. 26 , No. 5 　　　　　　　　 412 2004 年 3 月 ACTA 　ACADEMIAE 　MEDICINAE 　MILITARIS 　TERTIAE Mar. 2004 ( ) 论著　　　文章编号 2004 Long Evans 大鼠视网膜神经节细胞培养与鉴定 (第三军医大学西南医院全军眼科中心 ,重庆 400038) 王艳华 ,王　一 ,刘　勇 ,王仕军 , 曾玉晓　　 ( ) 　　提　要 : 目的　建立Long Evans 大鼠视网膜神经节细胞 RGCs 体外培养的方法 ,为 RGCs 的体外实验研究奠定基础。方法　出生后 1～3 d 的Long Evans 大鼠视网膜神经上皮层 ,胰蛋白酶 + 透明质酸酶消化制成单细胞悬液 ,用 DMEM 培养液进行培养 ,观察细胞生长规律 , 图像分析系统分析有突起的 RGCs 数目、胞体面积和最长的突起长度 ,Thy11 单克隆抗体和微管相差蛋白2 多克隆抗体荧光双标法鉴定 RGCs 。结果　Long Evans 大鼠 RGCs 体外培养存活 4 d ; 荧光双标显示 RGCs 纯度为 80 %～90 % 。结论　在普通培养基中Long Evans 大鼠 RGCs 体外培养能获成功。胰蛋白酶 + 透明质酸酶联合消化较单独用胰蛋白酶消化效果好。　　关键词 : 视网膜神经节细胞 ;细胞培养 ;Long Evans 大鼠　　中图法分类号 : R332 ; R322. 91 ; R329. 2 　　　文献标识码 : A Culture and identification of retinal ganglion cells in Long Evans rats WANG Yanhua , WANG Yi , LIU Yong , WANG Shijun , ZENG Yuxiao (Ophthalmology Research Center , Southwest Hospital , ) Third Military Medical University , Chongqing 400038 , China 　　Abstract : Objective 　To establish a culture method for in vitro culture of retinal ganglion cells (RGCs) in Long Evans rats. Methods 　Epithelium of neurosensory retina of Long Evans rats (postnatal 1 - 3 d) were digested by trypsin and hyaluronidase and cultured in DMEM. The growth of RGCs in vitro was observed un