比色法测定植物多糖含量方法概论.pdfVIP

4 北方药学 2011 年第 8 卷第 12 期 比色法测定植物多糖含量方法概述 梁存权 （内蒙古呼伦贝尔市药品检验所 呼伦贝尔 021008） 摘要：对比色法测定植物多糖含量进行综述, 旨在为植物多糖的相关研究提供参考。 关键词：多糖 比色法 含量测定 中图分类号：R2844444444444444444444文献标识码：B44444444444444444文章编号：1672- 8351（2011 ）12- 0004- 02 糖类是绿色植物光合作用的产物 ， 是动植物所需能量的 高的灵敏度 ，糖含量在 30ug 左右就 能进行测定，所以可作为 重要来源。 根据其能否水解以及水解产物的多少，可以分为单 微量测糖之用。 一般样 品少的情况下， 采用这一方法比较合 糖、二糖和多糖等几类。 多糖是存在于 自然界的醛糖和（或）酮 适 。 蒽酮硫酸法的缺点是蒽酮试剂不稳定，溶液需临时配制， 糖通过糖苷键连接在一起的聚合物（一般 10 个以上）。 是一切 该法稳定性较差 。 有生命的有机体必不可少 的成分，同维持生物机能密切相关。 3 3 ，5-二硝基水杨酸法（简称 DNS 法） 多糖在自然界分布极广，在高等植物、藻类、菌类及动物体内 DNS 法测定原理基于在一定的范围 内， 还原糖的含量和 均有存在。 研究表明多糖类成分具有多种药理活性，其在免疫 反应液颜色成比例关系，利用比色法可测定多糖的含量。 对没 调节、抗肿瘤、抗炎、抗溃疡、降低胆固醇、降血压以及抗血栓 有还原性的多糖， 可用酸水解法使其降解成有还原性的单糖 等多方面具有良好的药理活性。 如香菇多糖、灵芝多糖、猪苓 进行测定。 还原糖在碱性条件下加热被氧化成糖酸及其他产 多糖等具有抗肿瘤的作用；枸杞多糖、黄芪多糖和人参多糖等 物，3，5-二硝基水杨酸则被还原为棕红色的 3-氨基-5-硝基 具有增强免疫的作用；灵芝多糖、当归多糖等具有良好的降低 水杨酸。 在一定范围 内，还原糖的量与棕红色物质颜色的深浅 血糖作用；发菜多糖具有抗衰老作用；枸杞、银耳、云芝多糖有 成正 比关系， 利用分光光度计 ， 在 540nm 波长下测定吸光度 很好的抗辐射作用。 因此，多糖的研究越发引起国内外医药界 值 ，查对标准曲线并计算 ，便可求出样 品中还原糖和总糖的含 的重视。 量。 由于多糖水解为单糖时，每断裂一个糖苷键需加入一分子 多糖的含量测定方法很多，如比色法、滴定法、高效液相 水，所以在计算多糖含量时应乘以 0.9 。 DNS 比色法中，色素等 色谱法、气相色谱法、薄层扫描法、高效毛细管电泳法等。 目前 还原性物质可与 DNS 显色剂显色， 采用水解前测定值校正水 多糖含量测定多用比色法。 比色法分两大类，一类是当前最普 解后测定值 的方法，简便 、有效地排除了色素等杂质 的干扰 。 遍使用的方法， 利用多糖在强酸性条件下脱水生成糠醛或其 DNS 法测多糖含量具有操作简便 、快速 、灵敏度高、杂质干扰 衍生物，然后再与酚类或胺类化合物缩合，生成有特殊颜色的 较小等优点 。 物质 的这一性质进行测定。 这类方法有地衣酚-硫酸法、苯酚- 4 萨氏（Somogyi-Nelson ）法 硫酸法和蒽酮-硫酸法等。 另一类测定方法是利用了多糖的还 将多糖酸水解为还原糖，还原糖在碱性条件下加热 ，在酒 原性，测定还原性多糖的方法有 3，5-二硝基水杨酸（DNS）比 石酸钾钠存在的情况下， 可以定量地将二价铜离子还原为一 色法、Somogyi-Nelson 法等。 比色法历史悠久 ，20 世纪 40～50 价铜离子 ，即产生砖红色的氧化亚铜沉淀 ，其本身被氧化 。 氧 年代先后报道了咔唑-硫酸法、葸酮-硫酸法和苯酚-硫酸法测 化亚铜在酸性条件下，可将钼酸铵还原 ，还原型 的钼酸铵再与 定多糖含量。 目前比色法