动物疫病免疫试纸快速检测技术概论.pdfVIP

2009年第9期 动物疫病免疫试纸快速检测技术概述 张改平，郭军庆，李青梅 ，邓瑞广，杨艳艳 (河南省农业科学院 农业部动物免疫学重点开放实验室 河南省动物免疫学重点实验室，河南 郑州 450002) 摘要：概述 了免疫试纸检测技术的原理，并分别从抗原和抗体 2个方面简述免疫试纸检测技术的 应用及在此方面取得 的成就。 关键词 ：动物疫病 ；免疫试纸；抗原；抗体 中图分类号：S851．34 7 文献标识码：A 文章编号：1004—3268(2009)09—0174—03 免疫试纸快速检测技术是在单克隆抗体技术、 常按照一定的重叠关系粘贴于半硬式黏性底衬上， 胶体金标记技术和免疫层析技术基础上发展起来的 在样品垫、结合垫和吸收垫顶端覆盖有塑料保护膜 一 种新型体外检测技术，最早用于人类早孕的便捷 (图 1)。检测时免疫试纸样品端插入样品溶液，样 检测 ，是 理 想 的 即时 检 测 (point—of-caretest， 品垫 中的待检溶液通过虹吸作用扩散至结合垫，再 POCT)和现场检测技术[1。]。该检测技术不需要专 水化其吸附的胶体金标记物，并带动胶体金标记物 业技能和仪器，自20世纪80年代末建立以来发展 与分析物一起向检测膜扩散 ，最终渗透到吸收垫，待 迅速 ，广泛应用于各种分析物的定性和半定量快速 检溶液中的分析物在扩散过程 中与胶体金标记物相 检测，包括抗原、半抗原、抗体和核酸，已成为当今最 结合，形成胶体金标记物一分析物复合物，该复合物 快速敏感的免疫学检测技术之一。河南省动物免疫 可被检测膜上的分析物特异性抗体印迹(检测线)捕 学重点实验室从 1995年开始系统开展免疫试纸快 获和富集，形成明显的红棕色检测标记 “I”，未与检 速检测技术研究，率先将该技术引入动物疫病快速 测印迹结合的多余胶体金标记物继续扩散，被检测 诊断领域，建立了抗原、抗体和半抗原 3类靶标物的 膜上的胶体金标记物特异性抗体印迹 (对照线)固 免疫试纸快速检测技术体系，包含 6种技术模式，成 定 ，形成红棕色对照标记 “l”，2种标记组合叠加 ，形 功研制动物疫病及人兽共患病快速检测试纸和动物 成 2条红棕色阳性标记 “Il”；反之 ，没有胶体金标记 源食品安全快速检测试纸系列产品[3]，检测时间 物一分析物复合物形成，不能与检测印迹结合，只有 仅需要数分钟，无需任何附加试剂和设备，操作简 胶体金标记物与对照印迹相结合，则形成阴性标记 单，解决了传统检测方法费时(数小时至数天)、成本 “l”。如果检测膜上没有红棕色标记显示，则表明检 高(需贵重仪器或试剂)、操作复杂等问题，真正实现 测失败或免疫试纸失效[3]。免疫试纸快速检测技术 了长期以来人们在检测技术领域所追求的“快速、简 的原理见图2。 便、特异、敏感”的 目标 ，提高了我国在该领域的研发 2 抗原免疫试纸快速检测技术 水平 。 河南省动物免疫学重点实验室系统开展了鸡传 1 免疫试纸快速检测技术的原理 染性法氏囊病 (IBD)、鸡新城疫 (ND)、猪瘟 (CSF)等 免疫试纸快速检测技术是基于免疫层析原理建 重大动物疫病快速检测技术研究，制备和鉴定了多 立起来的。典型的免疫试纸分为 4个部分：样品垫、 种动物病毒的高特异性、高亲和力配对单克隆抗体， 结合垫(吸附胶体金标记物)、检测膜(含有检测线印