发酵食品中降胆固醇乳酸菌的筛选及生物学特性研究.pdfVIP

2013年2月 中央民族大学学报(自然科学版) Feb．，2013 第22卷第1期 Journalof Sciences V01．22NO．1 MUC(NaturalEdition) 发酵食品中降胆固醇乳酸菌的筛选及 生物学特性研究 刘 薇，刘长建，汤丽燕，姜 波，赵 冬 (大连民族学院生命科学学院，辽宁大连116600) 摘要：本实验利用4种培养基，从5种发酵食品样品中分离到473株乳酸菌，其中H：0：酶反应阴性的有 96株．从中筛选出了11株对胆固醇有较好降解能力的菌株，并对其生长特性，生化特性等进行了研究．根据 乳杆菌属．11株乳酸菌的胆固醇的降解率都大于40％，其中类布氏乳杆菌MRl2、AC01和植物乳杆菌SCl2的 胆固醇降解率超过了50％． 关键词： 发酵食品；乳酸菌；降胆固醇；生物学特性 中图分类号：Q939．9文献标识码：A 文章编号：1005—8036(2013101-0019-05 乳酸菌在自然界分布广泛，从远古时代，就被人们用于食品加工及保存中，特别是用于奶制品生产 以及肉、蔬菜、面包、青贮饲料的发酵等方面．乳酸菌的发酵过程能提高发酵食品的品质、改善食品的口 味，最近的研究表明乳酸菌具有降低人体胆固醇和血脂等功能，适量食用乳酸菌及乳酸菌发酵食品可有 效降低血液胆固醇含量，从而减少心血管疾病的发病几率‘1。．一般来说，血胆固醇浓度每上升1％，冠心 病死亡率则上升2％．因而，保持血液中胆固醇浓度在正常范围内对于预防动脉粥样硬化和心脑血管疾 病是至关重要的‘21．另有研究。证明，乳酸菌可以调节机体胃肠道微生态平衡，增强免疫力，防治肿瘤 等．因此，乳酸菌作为食品添加剂或者益生菌对人类健康起着巨大的作用．本试验是从发酵制品中分离 筛选出具降胆固醇能力的乳酸菌，并对其生物学特性进行了研究，为生产功能性食品奠定基础并提供菌 种资源． 1 材料与方法 1．1 材料 市售发酵食品泡菜、腊肠、萝卜干、豆腐干、榨菜购于大连开发区某超市． 1．2仪器与试剂 恒温培养箱(上海精宏)等．试验所用主要试剂胆固醇、正己烷、氢氧化钾等均是国药化学试剂公司分析 纯产品．显色剂：先配制FeCl，·6H：0的浓磷酸溶液，浓度为2．5％；移液管取8mL上述溶液，浓硫酸定 容100mL，即为显色剂，冷藏备用． 收稿Et期：2012—12-03 基金项目：国家自然科学基金(No 作者简介：刘薇(1990一)，女(拉祜族)，云南澜沧拉祜族自治县人，大连民族学院生命科学学院，本科学生，研究方 向：食品微生物． 通讯作者：刘长建，大连民族学院生命科学学院，工程师，E-mail：lcj@dlnu．edu．cn，电话 万方数据 中央民族大学学报(自然科学版) 第22卷 1．3培养基 还用到含0．12 mg／mL胆固醇的胶束液体培养基(以1000mL计)，分别称取0．12g胆固醇、0．24g牛胆 盐、0．12 g蔗糖酯、1．2mL吐温80，玻棒捻碎搅拌均匀，加5mL冰醋酸，60。C加热溶解．0．45斗m膜过滤 并快速加入到相应的液体培养基中，边加入边搅拌，使其形成均匀稳定的胶体溶液。61． 1．4磷硫铁法测定胆固醇的标准工作曲线 具塞试管分别加入2mL不同浓度的胆固醇乙醇溶液(浓度0～0．04 mL显色剂沿 mg／mL)，再取2 管壁缓慢加入，然后充分振荡使显色完全．冷却至室温，各浓度胆固醇反应液分别于450～650am范围 内进行波长扫描，并记录选定波长的光吸收值，对浓度做标准曲线． 1．5乳酸菌的初步分离 各种发酵食品分别取1g加入10mL无菌生理盐水，35。(2浸泡24h．10倍连续稀释法