筛选并利用抗砷菌与蜈蚣草互作对砷污染土壤修复作用的研究.pdfVIP

中国环境科学学会学术年会论文集(2009) 筛选并利用抗砷菌与蜈蚣草互作 对砷污染土壤修复作用的研究 曾 东1 许振成2 1．湖南农业大学 长沙410128：2．环境保护部华南环境研究所广州510655 摘要通过从石门雄黄矿区土壤中筛选得到了两株能在含砷浓度较高的培养基中生长良好的抗砷菌 F、H，并将其接种到蜈蚣草的根际，利用“抗砷菌一蜈蚣草”组成新的修复体系联合修复砷污染土 壤。结果表明：“抗砷菌一蜈蚣草”互相作用能明显提高蜈蚣草各部位对砷的吸收与富集能力，接种 F菌的蜈蚣草的生长效率增加了39．13％，根系的长度增加了45．45％，地上部分含砷量增加了 16．97％，接种H菌的蜈蚣草的生长效率增加了24．73％，根系的长度增加了27．27％，地上部分含砷 量增加了10．71％；测定其脯氨酸和丙二醛含量，F、H菌可以减少蜈蚣草植株地下部分丙二醛和脯氨 酸的含量，可以减轻砷对蜈蚣草的胁迫。至于抗砷菌是通过什么途径或方式与蜈蚣草相互作用达到这 一效果尚不太清楚，有待进一步探讨与研究。 关键词蜈蚣草根际微生物砷污染土壤土壤修复比 一、引 言 砷是一种有毒并致畸、致癌的化学元素¨j。砷的开采、冶炼和工农业生产与应用都对土壤 造成严重污染，甚至导致土地寸草不生，生态系统完全崩溃的恶果。自2001年Ma-2。等和陈同 斌。3j等分别在美国佛罗里达州和中国湖南省发现了首例砷的超累积植物后，国内外针对蜈蚣草 修复土壤重金属砷污染的研究十分活跃。但有关研究表明砷对蜈蚣草的根系的生长有明显的抑制 作用一。。此外，在实际应用中也发现蜈蚣草在砷污染较为严重的土壤上生长较慢、根系不发达、 生物量较小，致使修复效率较低。5‘。因此，如何改善蜈蚣草的生长条件，促进蜈蚣草根系的生 长发育，扩大或延长蜈蚣草根系与污染土壤的接触面积，从而在很大程度上增强蜈蚣革对污染土 壤中砷的吸收，加速砷污染土壤的修复效率就显得特别有意义。笔者利用“抗砷菌一蜈蚣草” 组成联合的修复体系这一新的方法提高砷矿区污染土壤的修复效率，缩短修复时间。本文通过筛 选确定选择“抗砷菌一蜈蚣草”组成新体系联合修复砷污染土壤，并测定其脯氨酸、丙二醛等 一系列抗逆性指标，研究其含量与植株受砷胁迫作用的相关性。 二、材料与方法 (一)菌株的筛选 将新鲜的蜈蚣草根际利用梯度稀释法分离后直接接人灭菌的含As的牛肉膏蛋白胨培养基中， 于28℃恒温箱中培养。培养7天后置4cc冰箱中保存，备用。 (二)盆栽试验 1．盆栽土壤准备 盆栽土壤取自湖南农业大学试验基地，每盆装土4kg，加入一定量的Na：HAsO。使土壤含砷 量达到1000rag／kg，每处理重复4次，喷施去离子水维持土壤湿润条件，保持1周。 表1供试土壤理化性质 总砷(me：／kg) 有效态砷(mg／kg) 有机质(％) 含水率(％) 4．3 0．075 】．41 6．84 第六章环境监督管理制度建设 2．供试蜈蚣草幼苗准备 从湖南常德石门雄黄矿区尾砂坝污染地区挖取蜈蚣草，将大块茎分成大小和长势基本一致的 带根的小块茎，除掉地上部，然后将这些小块茎分别移栽在小盆钵(装有机土Ikg)中，在 25。C，光照16小时的生长箱中育苗。 (三)菌株溶液准备 将上步所得单菌落分别接种于不含Na：HAsO。的液体牛肉膏蛋白胨培养基，将培养液在4。C 下离心后，倾去上清液，用无菌蒸馏水洗涤沉淀物，再用无菌水制成菌悬液。 (四)盆栽接种试验过程与取样 选择长势一致的蜈蚣草幼苗分成13组，每组4株，即重复4次；其中l组作为对照，其余 12组分别为菌悬液A、B、c、D…L处理。移植时对照组加入30ml无菌水；其余分别加入对应 的菌悬液各30ml。30天后收割，收割后称量植物鲜重和测量植物株高和根系长度；将植株分成 地上部分和根系两部分，将其杀青处理后再烘至恒重，测定各部分干重。再分别取样品、磨碎， 过100目筛，用于分析植株砷含量。 植物样品有效态砷含量的测定采用HNO，一HCIO