pH 胁迫下尖孢镰刀菌生长动力学模型.docVIP

pH胁迫下尖孢镰刀菌生长动力学模型( 蓝江林，肖荣凤，刘波(，朱育菁，车建美，林抗美 （福建省农业科学院农业生物资源研究所，福州 350003）6株尖孢镰刀菌菌株在不同pH值培养基，25℃培养4d的生长速度，结果表明培养基物pH值对每个菌株的生长速度均有影响，同一菌株在培养基不同pH下生长速度不同，在pH6-8范围内生长最适，菌落平均直径最大(45-49mm)，其次为pH4、5、9；而pH3、10、11菌落直径明显变小(17-21mm) 。各菌株在不同pH条件下菌落生长动力学模型符合二次曲线方程。培养14d后培养基物pH值对菌落形态、色泽有一定的影响，不同菌株在不同pH值培养基培养下产孢量也有差异。pH 4-8的平均产孢量最大，达(223.8-273.3)×104 cfu/ml，其pH =6.38（自然pH值）的产孢量最高，pH =11的产孢量最低。各菌株在不同pH条件下产孢量动力学模型符合二次曲线方程。 【关键词】pH；尖孢镰刀菌；生长动力学 Grow kinetic model of fusarium oxysporum in different pH Value Lan Jiang-lin，Xiao Rong-feng，Liu Bo*，Zhu Yu-jing，Che Jian-mei，Lin Kang-mei （Agricultural Bioresource Research Institute, Fujian Academy of Agricultural Sciences, Fuzhou 350003） 尖孢镰刀菌(fusarium oxysporum) 是一类既可侵染植物又可在土壤内生存的兼性寄生真菌，，，，引起农作物枯萎病，造成植株枯死，在植株的全生育期均可发生（严定平等，2008）。以瓜类枯萎病为例，病田一般减产2030%、严重田块可达5060%，甚至绝产（高军等，2006）。目前尚缺乏完全有效的防治方法。 致病菌的生物学特性是有效防治的基础，秦涵淳等（2009）研究了香蕉枯萎病菌尖孢镰刀菌的培养特性，结果表明尖孢镰刀菌菌落在pH值4.09.0范围内均可生长pH值为6.07.0时最适,菌落直径平均在3.73.9cm之间。刘智成对墨兰茎腐病原菌（Fusarium axysporum Schl．）开展生物学特性研究，结果表明：该病原菌菌丝生长和分生孢子萌发的最适温度为26，产生分生孢子的最适温度为24；菌丝生长最适pH为6～7，pH为9时最适产生分生孢子本来自黄瓜、甜瓜、西瓜三种作物上的菌株不同pH值马铃薯蔗糖琼脂(PSA)培养基119：F-H.6.5-03018-J2、菌株124：F-H.6.5-030318-J2。分离自甜瓜植株的尖孢镰刀菌菌株129：F-T.1.7-030514-12132：F-T.1.7-030520135：F-X.1.7-030520-11139：F-X.1.7-030527-02PS）培养液。在制备时均加链霉素以抑制细菌生长，用量为0.3g/L。 1.2试验方法 1.2.1 pH胁迫下尖孢镰刀菌形态变化 培养基物pH值的调节方法：培养液分装于300ml的三角瓶中，每瓶200ml，灭菌后用80％乳酸和过饱和Na2CO3调节培养基pH值，用pH试纸测定PSA培养基的pH值。在pH3~11范围内共9个梯度PSA培养基倒入直径10cm培养皿中，每皿接入各试验菌株的菌片1块〔直径4mm〕。每个处理重复三次。25℃，摇床转速为110rpm，4d后测量菌落直径(即生长速度)。14d后记录菌形态和色泽。 1.2.2尖孢镰刀菌生长过程pH自平衡模型 尖孢镰刀菌生长过程酸碱度的变化动态 选择菌株119和菌株151进行整个发酵过程pH值变化的观察。7d的平板上打取3个6 mm的菌片，置于盛有100 ml PSA液体培养基的250 ml三角瓶中培养，培养温度为25℃，摇床转速为110rpm，每天取2瓶，过滤去除菌丝，收集发酵液。测定指标，pH值的测定：取发酵液，用pH计测定其pH值，取其平均值。 尖孢镰刀菌生长过程pH自平衡作用 培养基pH值的调节方法：培养液分装于150ml的三角瓶中，每瓶25ml，灭菌后用80%乳酸和过饱和Na2CO3调节培养基物pH值，酸度计测定PS培养液的pH值，起始pH值分别为2、3、4……11共10个梯度pH值的测定：在调节好的PS培养液三角瓶中接入各试验菌株的菌片1块(直径4mm)。每个处理重复三次，不接种为对照。25℃，摇床转速为110rpm，14天后测定菌生长后的培养基pH值。 1.2.3pH胁迫下尖孢镰刀菌菌落生长动力学模型 实验方法同1.2.1方法同1.2.1，14d4mm的菌片5块，加5ml水搅拌，洗下孢子制成孢子悬液，用血球计数板记数孢子数，统计每个菌片上的