高效毛细管电泳内标法与外标法含量测定的比较.pdfVIP

第29卷，第5期 光谱实验室 V01．29。No．5 2 o1 Ch主，忱se 2 2年9月 Jottr眦￡of s印ctroscop，Labormory 高效毛细管电泳内标法与外标法 含量测定的比较① 蒋品 梁光义② 高言明 贺祝英“冯佑亮 张元仲 梁婷 杨延巍 吴明花 (贵阳中医学院实验中心贵阳市市东路50号550002) n(贵阳中医学院第一附属医院贵阳市宝山北路71号550001) 摘要比较研究高效毛细管电泳内标法与外标法进行含量测定结果的差异。采用高效毛细管电泳 内标法(以二苯胍为内标物)和外标法分别测定三黄泻心汤3种不同剂型中盐酸小檗碱的含量，并进行了 比较。。外标法测得结果较内标法偏低，高效毛细管电泳内标法比外标法含量测定结果理想。 关键词高效毛细管电泳；内标法；外标法；盐酸小檗碱 中图分类号：0657．8 文献标识码：B 文章编号：1004—8138(2012)05—2616一06 1 引言 高效毛细管电泳仪是近一二十年在分析化学中新兴的分析仪器，由于其较高的分离能力被分 析化学界所瞩目，尽管其有诸如分离效率高且用时短，消耗的样品溶液和溶剂量很少等优点，然而 其仍然存在某些缺点，如进样时采用压力进样，同时采用外标法，测定结果的准确性将难以保证。为 了克服由于进样体积不准导致的误差，可采用内标法。本研究以三黄泻心汤为研究对象，同时采用 内标法和外标法测定三黄泻心汤汤剂及其颗粒剂的中间产品复方浸膏和配方浸膏中盐酸小檗碱的 含量。通过测定结果的比较，以期为高效毛细管电泳(HPCE)在运用过程中能够更好地充分发挥其 优越性提供科学依据。 2 实验部分 2．1仪器与试剂 ‘ 司)。 汤汤剂、三黄泻心汤复方浸膏、三黄泻心汤单味配方浸膏均为自制。甲醇(色谱纯)；乙腈(色谱纯)； 硼砂日分析纯口。实验用水为娃哈哈纯净水。 2．2药材 ①国家自然科学基金；贵阳中医学院研究生教育创新计划项目(zYYcxl0029) ②联系人．手机：(oE—mail：465719757@qq．com 作者简介：蒋品(1989一)。男，安徽省蚌埠市人，在读硕士，主要从事中药质量控制及新药研究工作。 梁光义(1952一)．男，四川省岳池市人，教授，硕士，主要从事中药化学与天然产物化学成分工作。 收稿日期：2011—1l一10；接受日期：2011—12一13 万方数据 第5期 蒋品等：高效毛细管电泳内标法与外标法含量测定的比较 阳中医学院一附院药房，经贵阳中医学院第一附属医院贺祝英主任药师鉴定大黄为蓼科植物掌叶 燥根茎，黄芩为唇形科植物黄芩(Sc“￡ez肠r如缸如口彪咒如Georgi)的干燥根。 2。3实验方法 ．2．3．1高效毛细管电泳条件[1] 分离；盐酸小檗碱电泳峰对称因子为o．95—1．5之间；保留时间约为8min。 2．3．2溶液的制备 2．3．2．1对照品溶液的制备 并定容于25mI。容量瓶中，摇匀，制得小檗碱的质量浓度256pg／mL。 2．3．2．2内标溶液的制备 液。 2．3．2．3三黄泻心汤汤剂供试品溶液的制备 准确吸取新制汤剂5mL，置于10mI。容量瓶中，准确加入4mL 汤剂供试品液。 2．3．2．4复方浸膏供试品溶液的制备 50％甲醇二苯胍溶液定容至刻度，摇匀，即得复方供试品液。 2．3．2．5配方浸膏供试品溶液的制备 准确称取常压干燥至恒重并根据各单味浸膏得膏率按处方比例混合而成的三黄泻心汤配方浸 配方浸膏供试品液。 2．3．3专属性实验 按照2．3．1项下的“电泳条件”分别对各供试品溶液进行电泳，结果，各阴性供试品和内标物二 苯胍的混合溶液电泳结果相同，对盐酸小檗碱的测定无干扰；各样品供试品和内标物二苯胍的混合 溶液电泳结果相同，盐酸小檗碱与其他成分、内标峰完全分