两种鳞翅目幼虫对bt 敏感性的差异及其原理的探讨.pdfVIP

( ) 　中国生物防治 CH INESE JO URNAL O F B IOLO G ICAL CO NTROL 　1995, 11 2 75～ 79　 两种鳞翅 目幼虫对B t 敏感性的差异 及其机理的探讨 邵宗泽　崔云龙 ( 中国农科院生物防治研究所, 北京　100081) [ 摘要]　本文用生物鉴定和 等方法研究了两种鳞翅 目昆虫家蚕与菜粉蝶幼虫对4株苏 SD S PA GE 云金杆菌的敏感性差异及其机理。生物鉴定结果表明菜粉蝶幼虫对B t 的敏感性比家蚕低。用两种昆 虫的胃液体外活化伴孢晶体, 结果表明, 菜粉蝶幼虫胃液对伴孢晶体的活化能力低, 不能 SD S PA GE 将无杀虫活性的原毒素在短时间内转化为毒性肽。将伴孢晶体先经家蚕 胃液活化再饲喂菜粉蝶幼 虫, 同样条件下死亡率提高3～ 5倍。当菜粉蝶幼虫胃液的pH 值提高至10. 5后, 对伴孢晶体活化能力 与毒性肽的分子量与家蚕相似, 其敏感性与用家蚕胃液活化的饲喂结果也相似。胃液 pH 值偏低是菜 粉蝶幼虫对B t 敏感性比家蚕低的主要原因。 关键词　鳞翅 目　家蚕　菜粉蝶　苏云金杆菌　敏感性 同一 目不同科昆虫对同一种苏云金杆菌的敏感性存在着差异, 已是众所周知的事实, 但关 于其差异机理尚不十分清楚。从昆虫生理生化角度研究昆虫与杀虫伴孢晶体之间的相互关系、 探明差异性的机理, 对于研究如何提高B t 制剂的杀虫活性具有重要意义。本文比较了两种鳞 ( ) ( ) 翅 目不同科的昆虫菜粉蝶 P ier is rap ae L. 和家蚕 B om by x m or i 对同一血清型的4个B t 菌株的敏感性差异, 并对其差异机理进行了初步的探讨。 1　材料和方法 1. 1　菌体培养与伴孢晶体的收集 ( ) 供试菌株为库斯塔克变种 1菌株、 73菌株、81 菌株和 10 1菌株 本室保存 。 HD HD CB A F ( ) 供试菌的发酵及回收方法参照崔云龙等 1993 文献。 1. 2　昆虫饲养与胃液制备 家蚕和菜粉蝶幼虫在25 ℃下分别用新鲜桑叶和甘蓝叶片饲育。取两种5龄幼虫饥饿10小时 后用15 电压电击, 使其 胃液直接入冰浴的离心管中, 4 ℃下, 10000 离心10分钟, 取上清液, V g 分装于0. 5 洁净离心管中, - 20 ℃下保存备用。 mL 1. 3　 胃液的pH 值测量与调整 原胃液用0. 87%N aC l 稀释4 倍, 精密酸度计测得 胃液pH 值菜粉蝶幼虫为9. 72, 家蚕为 10. 32。用0. 5 2 3 3 ( 10. 5) 调整菜粉蝶幼虫胃液 值至105。 m o l L N a CO N aH CO pH pH 注: 　现工作单位为山东农业大学遗传所。 — 75 — 1. 4　蛋白质浓度测定 测定方法参照B radfo r