乙肝病毒X基因真核表达载体的构建及人肝细胞株HL-7702转染.pdfVIP

PO Box 2345 Beij ing 100023, China World Chin J Digestol 2004 March ; 12(3) :6 14-6 17 Fax: +86-10 世界华人消化杂志 ISSN 1009-3079 CN 14- 1260/R Email: wcj d@wj www.wj 2004年版权归世界胃肠病学杂志社 • 病毒性肝炎VIRAL HEPATITIS • 乙肝病毒X基因真核表达载体的构建及人肝细胞株HL- 7702转染 陈红英,唐南洪,张生君,陈治新,王小众 陈红英,张生君,陈治新,王小众,福建医科大学附属协和医院消化内 摘要 科 福建省福州市 350001 唐南洪,福建医科大学附属协和医院肝胆外科 福建省福州市 350001 目的:构建表达乙肝病毒(HBV)X基因的人肝细胞株. 陈红英,女, 1975-12-04生,福建省漳州市人,汉族, 2001年福建医科大学 协和医院消化内科硕士生,主要从事肝脏疾病研究. 项目负责人:王小众, 350001,福建省福州市,福建医科大学附属协和医院 方法:用PCR法扩增HBV X基因序列 将其添A后连至 消化内科. drwangxz@ PUCmT载体上 用EcolI和HindIII双酶切PUCmT-X和 电话: 0591-3357896-8482 收稿日期: 2003-10-31接受日期: 2003-12-08 PcDNA3载体 连接酶切片段PcDNA3及X片段以构建重 组质粒PcDNA3-X.用脂质体转染法将PcDNA3-X及空质 Construction of hepatitis B virus X gene 粒PcDNA3导入肝细胞HL-7702中 G418选择培养 RT- expression vector in eucaryotic cells PCR鉴定其稳定表达. and its transfection in HL-7702 cells 结果:已构建的PcDNA3-X经序列测定含有完整的HBV X Hong-Y ing Chen, Nan-Hong Tang, Sheng-J un Zhang, 基因片段 转入HL-7702细胞后经RT-PCR证实该细胞有 Zhi-X in Chen, X iao-Zhong Wang 稳定表达X蛋白. Hong-Ying Chen, Sheng-Jun Zhang, Zhi-Xin Chen, Xiao-Zhong Wang, 结论:成功构建了表达HBV X基因的肝细胞株 为进一步 Department of Gastroenterology, Union Hospital,Fu j ian Medical 探讨HBV X基因在肝炎与肝癌发生中的作用提供了理想的 University, Fuzhou 35000 1, Fuj ian Province, China Nan-Hong Tang, Department of Hepatobiliary Surgery, Union Hospital, 实验模型. Fuj ian Medical University, Fuzhou 35000 1, Fuj ian Province, China Correspondence to: Dr. Xiao-Zhong Wang, Depart