聚丙烯酰胺凝胶电泳检测致病疫霉菌SSR标记方法改良.pdfVIP

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PIanDiseasesandPes_ts 2011,2(4):3—5 ImprovementofPolyacrylamideGelEIeCtrOphOrUSin hthoramfeatansSSR Marker ZHANG Fang ,QUAN Jtm-li,SHANWei-xing CollegeofLifeScience,NorthwestA FUniversity,Yangling712100,China Abstract [Objective]rI1l。paperwastoimprovepolyacrylamidegelelectrophorusinPhytophthorai~emamssRMarker.[Me~od]WithtIlediseasesampleof 咖 am collectedfromGuyuaninNingxiaProvincein20o9astestmaterial,itsDNAwas extractedandampli6edwithPCR,anditsproductswerecarride out polyacrylma idegelelectrophoresis.[Result]12%polyacrylamidegelelectrophoresiswasusdetodetectprimersDI3,Gl1nadP102,and8%polyacrylamidegel elcetrophoresiswas usde todetectprimersPI4B,PI63,SSR4。SSR8na dSSRl1,then0.1% silvernitratewas usde tostain,nadanidealeleetrophoresisna dstai— ningeffcetwasobtainde.1Conclusionl eelcetrophoresisandstainingmethodsuitableforP infeatansSSRMarkerestbalishedinthestudyhadthecharacteris— ticsofhighsensitivity.simpleoperationandclearbands,whichwas na effcetive.simplenadquickdetcetionmethod. Keywords Polyacrylamidegelelectrophoras:PhytophthorairCestans:SSR:China Potatolateblight(Phytophthorainfestans)istheimportant Th emainbiochemicalreagentsused inhtetestsuchas Mraker. diseaseaffectingthegrowthanddevelopmentofpotatoinagricul- enzymes,dNrPs,aerylamidenadmethyleneacrylamidewerepur- turalproduction .ItiscausedbyP.infestans.andwillrapidly chasedfromDalinaBio—EngineeringCompnay. spreadwhentemperatureandhumidityreachcertainconditions, 1.2 DNA extraction GenomicDNA was extractedusingthe andtheinfectedplantswillwihterinlargearea .SSR (simple glassbeadsoscillationcrudeextractionmehtodimpmvedbyLabo. sequencerepeat)mrakersisanew,simplenadfastmolecular ratoryofCollegeofLifeScience inNorthwestA F University. markermehtod ,whichhas obviousadvantagesinstudyingpop- nadhtespecificmethodreferredto山atdescribedbyLIHai-juna ulationgeneticstructure.Therefore,the related research works eta1._l

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