人乳头瘤病毒18型E7基因和次级淋巴组织趋化因子基因疫苗的制备.pdfVIP

． 856· 中国新药与临床杂志(ChinJNewDrugsClinReni)，2009年 11月，第 28卷 第 11期 文章编 号]1007—7669(2009)11—0856-04 人乳头瘤病毒 18型E7基因和次级淋巴组织趋化因子基因疫苗的制备 曾凡慧a,b，朱 平 ，张昌菊 ，雷小敏 ，柳长柏 (三峡大学 a．分子生物学研究所 ；b．医学院；c．第二附属临床医学院 仁和医院，湖北 宜昌 443000) [关键词] 人乳头瘤病毒 18；趋化因子，CC；疫苗 ，DNA [摘要] 目的 以减毒的鼠伤寒沙门菌为载体，制备人乳头瘤病毒 (HPV)l8型E7基因与次级淋巴组织 趋化因子 (SLC)基 因疫苗。方法 PCR方法扩增 HPV 18E7和 SLC基 因片段 ，将其连接至peDNA3．1 (一)载体中，构建重组质粒pcDNA3．1(一)一HPV 18E7和 pcDNA3．1(一)一SLC。酶切及测序鉴定重组质粒。重组 质粒转染至小鼠黑色素瘤高转移细胞株Bl6F10中，RT．PCR和 Westernblotting方法检测 目的基因和蛋 白 的表达 ：重组质粒电转化导入减毒鼠伤寒沙门菌SI3261，酶切鉴定重组质粒的正确导入=结果 pcDNA3．1 (一)HPV18E7和peDNA3．1(一)一SLC经相应酶切及测序证实其大小