表达产肠毒素性大肠杆菌F41 重组干酪乳杆菌免疫小鼠的保护性分析.pdfVIP

中国农业科学 2009,42(11):4085-4092 Scientia Agricultura Sinica doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2009.11.041 表达产肠毒素性大肠杆菌F41重组干酪乳杆菌 免疫小鼠的保护性分析 1 1 1 1,2 2 刘建奎 ，魏春华 ，侯喜林 ，余丽芸 ，王桂华 1 2 （黑龙江八一农垦大学动物科技学院，黑龙江大庆 163319 ； 黑龙江八一农垦大学生命科技学院，黑龙江大庆 163319 ） 摘要： 【目的】利用干酪乳酸菌作为抗原传递系统来刺激机体产生黏膜免疫反应，从而研制有效的黏膜疫苗 预防 ETEC F41 的感染。【方法】重组菌在 MRS 培养基中进行表达，经 SDS、Western blot 检测目的蛋白的 表达，间接免疫荧光分析及流式细胞术检测外源蛋白展示到菌体表面。将重组菌及空质粒菌株分别滴鼻接种 SPF 级Balb/c小鼠，采集血液样品测定小鼠产生抗F41的特异性IgG，收集小鼠肺部冲洗液、肠道冲洗液、阴道冲洗 液及粪便样品测定小鼠产生抗 F41 的特异性 sIgA，并对小鼠进行攻毒保护性试验。【结果】重组干酪乳杆菌 pLA-F41/L.casei 免疫小鼠能够产生明显的抗 F41 的 sIgA 和 IgG 抗体水平，主动免疫组保护率在 85%以上，对照 组则全部死亡，被动免疫组新生幼鼠的保护率达80%，对照组保护率仅为5%。【结论】细胞表面锚定ETEC F41菌 毛蛋白的重组干酪乳杆菌pLA-F41/L.casei 通过滴鼻途径免疫能够有效预防F41型ETEC的感染。 关键词：ETEC F41；干酪乳酸菌；滴鼻免疫；保护率 Protection Against ETEC F41 After Intranasal Immunization with Recombinant Lactobacillus casei 1 1 1 1,2 2 LIU Jian-kui , WEI Chun-hua , HOU Xi-lin , YU Li-yun , WANG Gui-hua 1 ( College of Animal Science and Technology, Heilongjiang August First Land Reclamation University, Daqing 163319, Heilongjiang; 2College of Life Science and Technology, Heilongjiang August First Land Reclamation University, Daqing 163319, Heilongjiang) Abstract: 【Objective 】 The use of live Lactobacillus casei as an antigen delivery system elicit mucosal immunity and thus represents a promising strategy for mucosal vaccination to prevent ETEC F41 infection. 【Method 】 The re