过度拉伸对大鼠跟腱成纤维细胞中基质金属蛋白酶-2表达的影响.pdfVIP

第32卷 第9期 北 京 体 育 大 学 学 报 Vol_32 No．9 2009年 9月 JournalofBeijingSportUniversity Sep．2OO9 过度拉伸对大鼠跟腱成纤维细胞 中基质金属蛋白酶 一2 表达的影响 董 科 ，杨文贤 ，窦海波 ，张策雨 ，杨 力 (1．重庆大学体育学院，重庆 400044；2．河南师范大学体育学院，河南 新乡 453007；3．北京科技大学体育部 ，北京 100083； 4．北京体育大学，北京 100084；5．重庆大学生物学院，重庆 4ooo44) 摘 要：目的：通过体外对大鼠跟腱成纤维细胞过度拉伸来模拟体育训练跟腱损伤后重塑的效应分子MNP-2 和TIMP-1，2的响应和相关信号通路。方法：原代分离大鼠跟腱成纤维细胞，扩增后采用等双轴细胞力学拉伸 装置对细胞进行：1)正常对照组；2)14％力学拉伸组 ；3)力学拉伸组并加入NF-xB信号通路抑制剂。拉伸后提 取细胞上清液进行明胶酶谱法和VC-estemBlotting检测 NMP-2以及NF-xB磷酸化蛋白；并提取细胞总RNA，反转 录后进行半定量PCR对TIMP-1，2进行检测。，然后对MNP-2，TIMP-1，2等进行基因水平和蛋白水平的检测。结 果：1)力学损伤可使跟腱成纤维细胞M1VIP-2表达明显上升(P0．05)；2)力学损伤对跟腱成纤维细胞中TIMP- 1，2的表达无显著性影响；3)力学损伤可引起NF-xB磷酸化蛋白表达明显上升 (P0．05)；4)NF-xB抑制剂可明 显抑制力学损伤引起的MNP-2过量表达 (P0．05)。结论：体育运动引起的过度拉伸损伤可通过NF-KB上调 MNP-2的表达和活性，提示过度拉伸引起的运动损伤可能与跟腱损伤和病变通过MMP直接相关。 关键词：跟腱损伤 ；成纤维细胞；基质金属蛋白酶；NF-JcB 中图分类号：G8o4．7 文献标识码：A 文章编号：1007—3612(2009)09—0059—04 EffectsofInjuriousStretchontheExpressionof^ Ⅱ’2inTendonFibroblastsinSoorts DONGKe，YANGWen．xianz，D0UHai_boj，ZHANGCe．vu4，YANG (1．CollegeofPhysiealEducation，ChongqingUniversity，Chongqing4OOO44，Claim；2．CollegeofPhysicalEducation， HenanNormalUniversity，Xinxiang453007，HenanChina；3．DeparlmentofPhysiealEducation，BeijingUniversityof ScienceandTechnology，Beijing100083，China；4．GraduateSchool，BeijingSportUniversity，Beijing100084，China； 5．BioengineeringCollege，ChongqingUniversity，Chongqing4OOO44，China) Abstract：Aim,,TodeterminetheeffectofinvitroinjuryontheexpressionofMMP-2，TIMP-1，and2aswellasthetrader— lyingsig．alpathwayintendonfibroblasts．Methods：TendonfibroblastsaIeachievedfromprimarycellculturefromratten— dontissues，afterex