“银屑灵片”中药提取液对肿瘤坏死因子-α刺激后角朊细胞分泌细胞因子IL-8的影响.pdfVIP

· l862 · 辽宁中医杂志2009年第 36卷第 11期 “银屑灵片中药提取液对肿瘤坏死因子一)(【 刺激后角朊细胞分泌细胞因子IL一8的影响 卢传坚 ，刘凤年 (1．广东省中医院皮肤科，广东广州510120；2．东莞市中医院，广东广州510120) 摘 要：目的：观察不同剂量的“银屑灵片”对 TNF—d刺激产生的IL一8的抑制作用。方法：将 COLO一16传代，二 氧化碳培养箱中培养，取培养良好的COLO一16细胞 ，分为 10组，空白对照组，TNF— 对照组，其余分别为TNF一仅加 不同浓度的 “银屑灵片”中药提取液组，培养4h后用酶标仪测量各组OD值，建立标准曲线，用ELISA法测定各组IL一8 的含量。结果：“银屑灵片”的药液浓度越高，对TNF— 刺激产生的IL一8的抑制作用就越明显。结论：“银屑灵片”对 IL一8具有抑制作用，这可能是其治疗银屑病的免疫作用机制之一。 关键词 ：银屑病 ；银屑灵片；IL一8；TNF— 中图分类号：11758．63 文献标识码：A 文章编号：1000—1719(2009)11—1862—02 银屑病是一种 常见 的慢性皮肤病 ，亦是难 治病之 存 ，复苏后应用 。 一 。 其病理机制至今 尚未完全 阐明。 目前证实在其发 1．3 药物及试剂 病过程 中，有多种 免疫 因子参与 了其反应 ，有关 TNF— 人 TNF — 液 购 自 Peprotech 公 司 ，ED50 d和 IL一8在其发病过程 中发挥 的作用方 向的研究 日 0．05ng／mL。IL一8试剂盒 购 自上海森雄科技 公司 。 益增 多 。研 究认 为 TNF—d可 诱 导 IL一8的生成 ，从 RPMI一1640培养液 、胎 牛血清 、胰 蛋 白酶 、MTr(噻唑 而加重炎症反应 ，加重病情 …。因此 ，减少 IL一8的生 蓝 )、二 甲基 亚砜 (DMSO)(晶美生 物有 限公 司)。 成可成为药物 治疗作用之一 。 “银屑灵片 ”是本 院名 1．4 仪器 老 中医栩 国维教授 的经验方 ，应用于 临床 治疗银屑病 流式细胞仪 (美 国 COULTER公司 ，EPICSELITE 已5年余 ，收到 了较好 的临床效果 。本研究利用 TNF 型)孵箱 (HarrisHSO301T—UBA)(美 国) 一 诱导 IL一8的生成 ，同时加用 “银屑灵片 ”中药提 1．5 实验方 法 取液干预 ，通过对 IL一8剂量 的测定来探讨 “银屑灵 1．5．1 细胞传代及加药 角质形成细胞株在含 10％ 片 ”治疗银屑病 的免疫作用机制 。 的胎牛血清 的完全 RPMI一1640培养液 中以 1：4的传 1 材料 和方 法 代密度传代 ，置 于 37~C、5％二氧化碳培养箱 中贴壁生 1．1 中药 提 取 液 长 48h。在显微镜下观察 4瓶 COLO一16细胞 贴壁生 将 “银 屑灵 片 ”的 中药水 煎 、萃取 ，放 至冰 箱 一 长 情况 良好 ，已长 满 瓶 壁 的 70％ ～80％ ，取 生 长 状 态 20℃保 存 。 良好 的 COLO一16细胞 ，按 5X10 ／mL密 度 、IO0t~L／ 1．2 细 胞 孔接种 到 96孔板 中，使细胞密度达 到 5X10／孔 。置 角质形成细胞株 COLO一16购 自北 京医科大学 ， 于 37oC、5％二 氧化碳 培养箱 中贴壁 生长 48h。显微镜 中国医学科学 院 中国协 和 医科大学皮肤病研 究所保 下