补肾活血方对家兔膝骨关节炎模型滑膜组织MMPs的影响.pdfVIP

LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH2011VOL．22NO．12 时珍国医国药2011年第22卷第 12期 补 肾活血方对家兔膝骨关节炎模型 滑膜组织 MMPs的影响 阚卫兵 ，袁 琴 ，宋朋飞 ，王拥军 (1．上海中医药大学附属普陀医院，上海 200062；2．上海中医药大学脊柱病研究所，上海 200032) 摘要：目的 观察 自拟补肾活血方对家兔膝骨关节炎(0A)模型滑膜组织MMPs调控的作用。方法 Hulth方法建立膝骨 关节炎模型，给予补肾活血方干预，常规抽提和纯化RNA，采用AffymetrixRat2302．0Array芯片检测滑膜组织的基因表 达变化。结果 芯片结果显示模型组滑膜组织MMP2、MMP3、MMP7、MMP9、MMP12表达明显高于正常组滑膜组织，补肾 活血方对其有明显下调作用。结论 MMPs在膝OA滑膜组织表达升高，导致关节软骨降解，促进骨关节炎的形成，而补 肾活血方可以下调 MMPs的表达，促进软骨的修复，是补肾活血法中药治疗骨关节炎的机制之一。 关键词：膝骨关节炎；补肾活血方；MMPs；基因芯片；家兔 DOI标识 ：doi：10．3969／j．iSSI1．1008-0805．2011．12．055 中图分类号：11285．5 文献标识码 ：B 文章编号：1008-0805(2011)l2_2949-I)2 骨性关节炎(OA)为老年人常见、多发且 比较难治的一种慢 显退变，滑膜组织增厚，病变符合骨关节炎的基本变化。 性进行性骨关节病。我国50岁以上人 口发病率为5％，膝关节 AffymetrixRat230AGeneChip检测结果发现模型组滑膜组织 骨性关节炎的发病率为9．56％，60岁以上人El发病率为20％，MMPs的变化是显著的，而补肾活血法中药对其具有普遍的调控 膝关节0A发病率为78．5％l13。其特征是关节软骨进行性降解，作用(见表 1、图1)。 出现关节周边骨赘形成、软骨下骨板增厚。目前国内中医对 OA 表 1 正常组、模型组和中药组滑膜组织MMPs的表达 的治疗多以补益肝肾、活血化淤为法，疗效也较明显。为进一步 揭示补肾活血方对膝骨关节炎家兔滑膜组织的干预作用，上海中 医药大学附属普陀医院伤骨科采用 AffymetrixRat2302．0Array 基因表达谱芯片对家兔膝骨关节炎滑膜组织进行了检测，现报道 如下。 1 材料和方法 1．1 动物 实验采用雄性新西兰家兔21只，体质量 1．9—2．8 kg，由上海市松江区松联实验动物场提供 ，动物合格证号 ：SCXK (沪)2002—0012。 皿 正常 组 1．2 造模方法及给药 随机分为3组，正常组 、模型组和中药组 ●模 组 各7只。模型组和中药组家兔采用Huhh方法造模，造模9周后 ， 口l1曲组 给予中药灌 胃，中药干预4周后处死动物 ，摘取膝关节滑膜组织。 1．3 中药处方组成 药物组成：熟地黄，黄芪，当归，怀牛膝 ，鸡血 上上 藤，骨碎补 ，补骨脂 ，水蛭，由上海中医药大学附属普陀医院中药 制剂室煎制浓缩。 1．4 RNA抽提和纯化 采用Trizol方法抽提滑膜组织总RNA，琼 图1 正常组、模型组和中药组滑膜组织MMPs的表达 脂糖电泳检测纯度。RNA的纯化采用QIAGENRneasyTotalRNA 由表 1图 1可 以看 出，MMP2、MMP3、MMP7、MMP9和 Isolationkit试剂盒 ；Poly(A)mRNA的提取采用 Q~ACF,NOligotex MMP12在家兔膝骨关节炎模型滑膜组织中表达是升高的，补肾 DirectmRNAkit试剂盒。 活血中药对其具有普遍的下调作用。 1．5 基因芯片检测及数据读取 芯片检测采用Affymetrix公司的 3 讨论