多西环素对缺氧大鼠心肌细胞缝隙连接蛋白43表达的影响.pdfVIP

· 502 · SouthChinaJournalofCardiovascularDiseases，July2013，Vol19，No4 doi：10．3969／j．issn．1007-9688．2013．04．035 ·实验研究 · 多西环素对缺氧大鼠心肌细胞缝隙连接蛋白43表达 的影响△ 罗 刚 ，巫相宏 ，安 迪 ，黄 文 (1．广西医科大学附属第一医院心血管内科 ，南宁530021；2．广西医科大学附属第一医院神经内科 ，南宁 530021) 摘要 ：目的 探讨多西环素对缺氧大鼠H9c2心肌细胞缝隙连接蛋 白43(connexin43，Cx43)表达的影响及其可 能的机制。方法 培养大鼠H9c2心肌细胞 ，用WesternBlotting法检测缺氧6h、12h、24h后Cx43总蛋 白的表达 量及基质金属酶抑制剂(多西环素)、PI3K抑制剂(LY294002)、ERK1／2抑制剂 (U0126)干预缺氧H9c2心肌细胞 后Cx43总蛋白的表达量改变。结果 缺氧组较空白对照组 Cx43总蛋白表达量明显降低 ，差异有统计学意义 (P0．01)。缺氧6h时 ，多西环素和U0126干预组较缺氧组 Cx43总蛋白表达量明显增高 ，差异有统计学意义 (P0．05)；缺氧 12h时，U0126干预组 Cx43总蛋白表达量仍较缺氧组增高 ，差异有统计学意义 (P0．05)；缺氧 24h时，多西环素和 U0126干预后 Cx43总蛋白表达量与缺氧组比较，差异无统计学意义 (P0．0．05)。LY294002 干预组 Cx43总蛋白表达量在观察时间范围内均较缺氧组显著降低 ，差异有统计学意义 (P0．01)。结论 在培养 的大鼠H9c2心肌细胞中，多西环素通过抑制基质金属酶增加缺氧心肌细胞 Cx43总蛋白表达量 ，该作用至少部 分抑制由ERK1／2信号介导的传导通路 。 关键词：缺氧；心肌细胞；连接蛋白；基质金属蛋白酶：多西环素 ；大鼠 · 中图分类号 ：R364．4 文献标志码 ：A 文章编号 ：1007—9688(2013)04—0502—04 Effectofdoxycyclineonconnexin43proteinexpressionofcardiomyoblastcellsinanoxicrat LUO Gang，WU Xiang-hong，AnDi，HUANGWen (1．DepartmentofCardiology，TheFirstAffiliatedHospitalofGuangxiMedicalUniversity，Nanning530021， China；2．DepartmentofNeurology， TheFirstAffiliated HospitalofGuangxiMedicalUniversity， Nanning 530021。China) Abstract：Objectives Toinvestigatetheeffectsandthepossiblemechanismsofdoxycyclineontheexpressionof connexin43(Cx43)inratH9c2cardiomyoblastcellsunderhypoxicconditions．Methods H9c2cardiomyoblastcells wereculturedwithhypoxiatreatmentfor6h，12hand24h．ExpressionsofCx43incardiomyocyteswerequantifiedby WesternBlotting，aswellasthechangesintervenedbymatrixmetalloproteinases(MMPs)inhibitor(doxycycline)，PI3K inhibitor(LY294002)，ERK1／2inhibitor(U0126)underhypoxicconditions．Results ExpressionofCx43inhypoxia groupwasobviouslylowerthanthatinnormalcontrolgroup fP0．