实时荧光PCR法检测急性角结膜炎结膜拭子标本中的腺病毒.pdfVIP

中国卫生检验杂志2011年 12月 第21卷 第 12期 ChineseJournalofHealthLaboratoryTechnology．Dec2011；Vol21 No12 【临床检验】 实时荧光PCR法检测急性角结膜炎结膜拭子标本中的腺病毒 张西凤 (山东省滕州市精神病医院，山东滕州 277500) [摘要] 目的：利用实时荧光PCR技术，建立一套快速可靠的检测急性角结膜炎腺病毒的方法，并分析我院临床诊断为 急性角结膜炎的疑似腺病毒感染患者的不同型别腺病毒的感染情况。方法：设计并利用adl，ad3，ad4，ad8，adl9和 ad37型的特异性引物，建立Real—timePCR方法检测角结膜炎标本中腺病毒DNA，并对我院168例急性角结膜炎腺病毒 感染疑似患者结膜拭子样品进行实时荧光定量PCR检测。结果：验证5对引物，分别只扩增出相对应的Adv标准株，未 见其他非特异性扩增，168份眼拭子标本中，共检出腺病毒49株，总阳性率为29．2％，其 中adl型2例，占腺病毒的 4．1％，ad3型31例，占腺病毒的63．3％，ad8型9例 ，占腺病毒的 18．4％，Ad4型4例，占8．2％，Ad19／37型6例，占 12．2％，其余 119例为阴性。结论：Real—timePCR技术具有敏感、特异等优点，适用于急性角膜结膜炎标本中腺病毒的 检测及分型。2010年 1月一2010年 12月我院急性角膜结膜炎感染的腺病毒主要为Ad3型和Ad8型。 [关键词] 急性角结膜炎；腺病毒 ；实时荧光定量PCR [中图分类号】 R446．5 [文献标识码] B [文章编号] 1004—8685(2011)12—2923—03 Detectionofadenovirusesfrompatientswithacutekeratoconjunctivitisbyreal—timePCR ZHANGXi—jng (TengzhouMentalHospital，Tengzhou277500，China) [Abstract] Objective：ToestablishafastandeffectivemethodbasedonReal—timefordetectingadenovimsesfrompatients withacutekeratoconjunctivitis．Toanalyzethedifferenttypesofadenovirus(Ad)fromkeratoeonjunctivitiscaseswhichwereSUS． pectedcausedbyadenovirusinourhospita1．M ethods：Fivepairsofspecificprimem forthegeneofadl，ad3，ad4，ad8，adl9 andad37weredesignedandappliedtodetectadenovirusDNAbyReal—timePCR．168specimenscollectedfrom thelowerpalpe． bralconjunctivaeofpatientswitllkeratoeonjunctivitis．whoweresuspectedasadenovirusinfectioninourhospitalweretestedby Real—timePCRmethod．Results：5pairsofprimerswereconfirmedtoamplifythecorrespondingAdvstandardstrains．witIlout othernon—specificamplification．ThepositiveratesofadenovimsinspecimensbyReal—timePCRwere29．2％ (49／168)．Th e 49adenovirussampleswereidentifiedasadl(2samples，4．1％)，ad3 (31samples，63．3％)，ad8(9sam