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1356 中国公共卫生2009年 11月第25卷第 11期 ChinJPublicHealthNov2009Vo1．25No ． 11 浓度则与文献 有所不同。用本优化方法可将 10株金葡菌 临床分离株分为3型。与文献 比较，使用另一种重复序列 ERIC为引物的ERIC—PCR所得的指纹图谱与 REP—PCR 指纹图谱完全不同。前者扩增条带在0．25—2．5kb之间。可 辨区带的数 目为9～11条，表明引物不同，指纹图谱也不相 同。本研究结果显示，金黄色葡萄球菌标准株和临床分离株 REP—PCR指纹图谱均在0．5—1．0kb之问出现了1条长度 相同条带，该条带是否为金黄色葡萄球菌特征条带还需进一 注：M：500bpDNALadder；1～1O：临床分离株1～10。 步研究。 图4 金葡菌临床分离株DNAREP—PCR电泳图谱 参考文献 3 讨 论 (1] 孔秀凤，祁伟．金黄色葡萄球菌基因分型方法的研究进展[J]． 重复DNA序列是20世纪90年代发现存在于原核生物 国外医药抗生素分册，2008，29(3)：104—108． 基因组中的DNA片段 ，主要为重复基因外回文序列 (REP) [2] 彭颖 ，吕建新，叶嗣颖，等．幽门螺杆菌临床分离株的REP— 和肠细菌重复基因基准序列 (ERIC)。REP—PCR即以REP PCR分析 【J]．遗传，2002，24(6)：684—686． 序列为引物，对细菌基因组DNA进行PCR扩增，可根据得到 [3] 朱林江，郑飞云，赵亚洲，等．Rep—PCR应用于快速鉴定啤酒污 的电泳指纹图谱的差异，对细菌进行分型或同源性检测。该 染菌的研究[J]．生物工程学报，2006，22(6)：1013—1020． 法操作方便，分辨效果好 。本研究以金黄色葡萄球菌标准 [4] 彭源东，张忠泽，丁鉴．用Rep—PCRDNA指纹鉴别Frankia菌 株ATCC25923为对象，对REP—PCR反应体系Mg 浓度、 [J]．微生物学杂志，1998，18(1)：1—5． 模板量、引物浓度和退火温度进行优化，成功建立了金黄色葡 [5] 金莉莉，董雪，王秋雨，等．沈阳市副溶血弧菌重复序列PCR分 萄球菌REP—PCR指纹图谱分型方法。结果表明，在25 L反 型 [J]．中国公共卫生，2008，24(3)：351—353． 应体系中，DNA模板量为 125ng，Mg 浓度为2．5mmol／L， [6] 黄革，董婷，侯铁英，等．重复序列引物聚合酶链反应追踪金黄 REP1R、REP2引物浓度分别为 0．6~moVL，退火 温度为 色葡萄球菌所致医院感染 [J]．中国感染与化疗杂志，2006，6 40℃时，扩增产物的电泳图谱条带最清晰、明亮。其中Mg (4)：260—262． 浓度与文献 相同，退火温度与文献l4一致 ，模板