可溶型白细胞介素-13受体α2对成纤维细胞胶原蛋白合成的抑制作用.pdfVIP

南昌大学学报 (医学版)2012年第 52卷第 l期 JournalofNanchangUniversity(MedicalScience)2012，Vo1．52No．1 1 可溶型 白细胞介素-13受体 a2 对成纤维细胞胶原蛋 白合成 的抑制作用 石小玉h，熊丽霞 ¨，周 莹 ，蔡 伟 ，赵 林。，章克萍h，李文林 (1．南昌大学a．医学实验教学部 ；b．基础医学院；2．江西省 医学科学研究所 医学生物高技术重点实验 室，南 昌 330006) 摘要：目的 应用可溶型IL一13受体a2(slL一13Ra2)抑制成纤维细胞胶原合成，探索生物治疗纤维化的新途径。 方法 构建 pMSCV／slL一13Ra2载体和表达 slL-13Ra2的细胞模型，分子量 (0．2×10)滤膜离心浓缩培养液 ，Ni2 亲和层析 ，SDS分析 sI 13Rn2，Westernblot检测 sIL一13R口2，RT—PCR和羟脯氨酸法显示成纤维细胞 I型 胶原蛋 白的表达 。结果 构 建 的重组 体 pMSCV／slL-13Ra2成功转 染入 HEK293细胞 ，并表达 sIL一13Ra2。 50 g·L IL-13促进人瘢痕成纤维细胞系 CRL一1762生成 I型胶原蛋 白，50vmol·L～ sIL一13Ra2能有效抑制 IL-13刺激 CRL-1762细胞合成 I型胶原蛋 白。结论 sIL一13Ra2靶 向 IL一13抑制成纤维细胞 I型胶原蛋 白的合 成 关键词 ：成纤维细胞；白细胞介素13受体；I型胶原蛋白 中图分类号 ：R349．8 文献标志码 ：A 文章编号 ：100o一2294(2012)01--0001--05 InhibitoryEffectofSolubleIL—-13ReceptorAlpha2on FibroblastCollagenSynthesis SHIXiao-yuh，XIONG Li-xia ，ZHOU Ying ，CAIWei ， ZHAO Lin ，ZHANG Ke-ping ，LIW en—lin (1a．DepartmentofMedicalExperimentalTeaching； lb．BasicMedicalCollege；2．KeyLaboratoryofMedicalB0Pc^，z0Z0g ， JiangxiInstituteofMedicalResearch，NanchangUniversity，Nanchang330006，China) ABSTRACT：Objective Toexploreanew biologicaltherapyinfibrosisthroughinhibitingfibro— blastcollagensynthesisbysolubleIL-13receptora2(sII-13Ra2)．Methods ThepMSCV／slI一13 Ra2vectorwasconstructedandcellmodelexpressingsIL一13Ra2wasestablished．Themedium wasconcentratedbyultrafiltration (0．2×10一molecular—weighoutoff)andsIL一13Ra2wasana— lyzedbyNi2affinitychromatography，SDSandWesternblot．Theexpressionoftype I collagenprotein in fibroblastswasdetected byRT—PCR andhydroxyprolinemethod．Results HEK293cellsweresuccessfullytransfectedwith theconstructedrecombinantpMSCV／sIL一13 Ra2andexpressedsII一13Ra2．Type I collagen