摩根摩根菌对碳青霉烯类药物耐药机制的研究.pdfVIP

· 266 检验医学 2012年4月第27卷第 4期 LaboratoryMedicine，April2012，Vol27．No4 文章编号：1673—8640(2012)04-0266-05 中图分类号：R378．2 文献标志码：A 摩根摩根菌对碳青霉烯类药物耐药机制的研究 施德仕， 蒯守刚， 邵海枫 ， 王卫萍， 张晓文 (南京军区南京总医院解放军检验医学研究所，江苏 南京 210002) 摘要：目的 分析从外科重症监护病房 (SICU)分离的对碳青霉烯类药物耐药的3株摩根摩根菌 (M1、M2和 M3)的耐药机制和传播方式。方法 采用琼脂稀释法进行药物敏感性试验；肠杆菌科基因间重复性一致序列 (ERIC)一聚合酶链反应 (PCR)用于分析菌株的分子流行病学特征 ；特异性PCR扩增检测细菌编码B．内酰胺酶的 基因；接合试验和提取质粒进行酶切分析耐药基因可传递性和耐药质粒的同源性 ；耐药基因两边序列测序分析 耐药基因的遗传背景；提取外膜蛋白电泳分析菌株外膜蛋白的改变。结果 3株分离菌和对应的接合子均扩增 出介导碳青霉烯类耐药的肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶(KPC)-2型基因，其中M1和M2为相同克隆株；质粒接合试 验成功传递了对碳青霉烯类药物的耐药性，KPC-2基因被携带在酶切后片段完全不同的3个质粒上，耐药基因 的遗传背景却相同；3株菌均缺失了相对分子质量约为38000的外膜蛋白而出现36000的外膜蛋白。结论 3 株菌来 自2种克隆株，均携带KPC-2基因。该基因由3个不同的质粒携带，同一可移动序列可能介导了KPC-2 基因在3株细菌的不同质粒上转移。产KPC-2型碳青霉烯酶及外膜蛋白缺失可能共同导致了所分离的摩根摩 根菌对碳青霉烯类抗菌药物耐药。 关键词：摩根摩根菌 ；碳青霉烯类；B一内酰胺酶；耐药性 A studyontheresistancemechanism ofMorganellamorganiitocarbapenems SH／Deshi，KUA1Shougang， SHAOHafieng，WANGWeiping，ZHANGXiaowen． (InstituteofClinicalLaboratoryMedicineofPeopleSLiberation Army，NanjingGeneralHospital，JiangsuNanfing210002，China) Abstract：Objective Toinvestigateresistancemechanismstocarbapenemsandtransmissionmodesof3 Morganellamorganiiisolates(M1，M2andM3)isolatedfrom patientsinsurgicalintensivecareunit(SICU)． M ethods Thesusceptibilityofantimicrobialagentswasdetectedbyagardilutionmethod．Themoleculra epidemiological characteristicsoftheisolateswereanalyzedbyenterobacterialrepetitiveintergenicconsensus(ERIC)一polymerasechain reaction(PCR)．Theencodinggenesofbeta—lactamaseswereanalyzedbyspecificPCRamplification．Thetransitivitynad homologyofplasmidsweredetectedbyplasmidconjugationandrestrictionendonucleaseanalysis．Geneticenvironments around blaKec were naalyzed by sequencing． Th e changes ofouter membrnae permeability were analyzed by