重组高产H1N1亚型猪流感疫苗株的构建与鉴定.pdfVIP

中国动物传染病学报 2012，2O(6)：1-5 ChineseJourna1ofAnima1InfectiousDiseases · 研究论文 · 重组高产H1N1亚型猪流感疫苗株的构建与鉴定 温峰，于 海，黄梦，杨馥如，马继红，周艳君，李泽君，童光志 (中国农业科学院上海兽医研究所，上海200241) 摘 要：为制备一株猪流感灭活疫苗的候选毒株，本研究利用反 向遗传学技术，将A／swineG／uangdong／1／11(H1N1)毒株的 HA、NA基因和AP／PU8／34毒株的PB2、PB1、PA、NP、M、NS基因进行重组，成功拯救出鸡胚高度适应性毒株rH1N1。抗原 性分析显示rH1N1保留了亲本毒株 良好的抗原性。rH1N1接种 10日龄鸡胚48h后，血凝价达到2，表明该毒株能在鸡胚中高 水平复制。该毒株为H1N1亚型猪流感灭活疫苗的研制奠定了坚实的物质基础。 关键词：猪流感；H1N1亚型；高繁殖力；反向遗传 中图分类号：$852．659．5 文献标志码：A 文章编号：1674．6422(2012)06—0001．05 GENERATIoNAND CHARACTERIZATIoNoFAHIGH．GRoW TH REASSoRTANTH1N1INFLUENZAVIRUSFoR DEVELoPMENToFSW INE VACCINE WENFeng，YUHai，HUANGMeng，YANGFu—ru，MAJi—hong，ZHOUYan-jun，LIZe-jun， TONG Guang-zhi (ShanghaiVeterinaryResearchInstitute，CAAS,Shanghai200241，China) Abstract：Inthepresentstudy,reversegeneticswasappliedtogenerateahigh—growthreassortantH1N1subtypeinfluenzavirus(rH1N1) fordevelopmentofaninactivatedswinevaccinewithgoodimmunogenicityandefficientpropagationineggs．ThereassortantH1N 1viurs containedHAandNAgenesfromanovelisolate[A／Swine／Guangdong／1／l1(H1N1)]andsixinternalgenesfromhigh—growthA／Puerto Rico／8／34(PR8)viurs．TheantigenicanalysisshowedthatrH1N1retainedgoodimmunogenicityofitsparentviruses．Thegrowthproperty ofrH1N1wasdeterminedin10-day-oldSPFembryonatedeggs．AllembryonatedeggssurvivedandHAtitersofrH1N1reachedto1024 at48hpostinoculation．Theseresultsindicatedthatthehigh-growthreassortantrH1N1possessedcharacteristicsoftheseedviursfor developmentofaninactivatedswineinfluenzavaccine． Keywords：Swineinfluenzaviurs；H1N1subtype；high-growth；reversegenetics 猪流感 (swineinfluenza，SI)是由猪流感病毒 得到，该毒株被认为是 1918年西班牙大流行H1N1 (Swineinfluenzavirus，SIV)引起的急性、高传播 流感病毒在猪群中演化而来n。在世界各国的猪群 性呼吸道疾病。猪流感病毒属于正粘病毒科 ，A型 中分离得到的猪流感病毒主要为H