电针对局灶性脑缺血大鼠脑组织CREB基因表达的影响.pdfVIP

2010年 12月第32卷第 12期 湖北 中医杂志 HubeiJournalofTCM ·5 · Dec．2010．Vo1．32，No．12 电针对局灶性脑缺血大鼠脑组织 CREB基因表达的影响 付雷，易艳东，张唐法，黄浩 (武汉市第一医院中心实验室，湖北 武汉 430022) 摘 要：目的 观察电针对局灶性脑缺血大鼠顶叶皮质cAMP反应元件结合蛋白(CREB)和磷酸化CREB(P — CREB)表达的影响。方法 采用中脑动脉闭塞 (MCAO)大鼠模型，将90只雄性 sD大鼠随机分为正常组、模型 组和电针组。电针组以韩氏穴位神经刺激仪 电针 “百会”、“水沟”穴，每 日1次，留针 30min，治疗 15d。治疗结束 后 ，用神经行为学评分标准评定大鼠的神经功能。应用实时定量PCR、WesternBlotting和图像分析方法检测大鼠缺 血侧顶叶皮质 CREB和pCREB的表达。结果 经 电针治疗后，脑缺血损伤大鼠的神经行为功能得到不同程度的恢 复。模型组CREB表达较正常组减少，pCREB表达低于正常组 (均P0．01)；治疗组CREB和pCREB表达高于模 型组 (均P0．O1)。结论 电针对缺血神经元的保护作用可能是通过上调CREB基 因的表达来实现。 关键词 ：脑缺血 ；电针 ；cAMP反应元件结合蛋 白；顶叶皮质 中图分类号 ：R245．3 文献标识码：A 文章编号：1000—0704(2010)12—0005—03 脑缺血是严重危害人类生命健康的疾病，目前尚无有效的 鼠腹腔麻醉并保温。麻醉大鼠仰卧固定于手术台上 ，常规皮肤 治疗方法。研究表明，在脑缺血急性期，加强神经保护 ，挽救缺 消毒后，颈部正 中切 口，暴露右侧颈总动脉 (CCA)，分离出颈内 血灶半影区和缺血敏感区的神经元、减少缺血神经元死亡对脑 动脉 (ICA)、颈外动脉 (ECA)，电凝 ECA入脑分支，结扎游离 缺血的康复非常重要…。环磷酸腺苷反应元件结合蛋 白 ( ECA主干 ，分离 ICA主干至翼腭动脉(PPA)，并在其起始部位置 cAMPresponseelementbindingprotein，CREB)作为一个重要的转 一 动脉夹，先将 CCA用动脉夹夹住，再在 ECA残端剪0．2mm的 录因子是多种信号转导通路的关键调节因子，可调节多种基因 小口，将栓线插入，轻推尼龙线端经CCA分又部沿 ICA入颅，至 的表达 。电针对脑缺血损伤大鼠有一定的治疗作用 ，但对其 大脑中动脉(MCA)，遇阻即止，尼龙线插入深度约 18mm，松颈总 作用机制的研究较少。本实验观察电针对脑缺血损伤大 鼠顶叶 动脉夹。1h后抽取栓线对大鼠进行脑缺血再灌注，缝合切 口后， 皮质组织CREB和pCREB(phosphorylatedCREB)的表达，以及其 用碘酒消毒，动物保温喂养。 神经行为学功能的影响，现将结果报告如下。 1．4 治疗方法 1 材料与方法 电针治疗组动物清醒后立即给予电针治疗。参照大鼠穴位 1．1 动物及分组 图谱_4模拟人体经穴定位，并结合中国针灸学会制订的 《头皮 SPF级 SD大 鼠90只，雄性，体重 180—200g(由湖北省动物 针穴名 国际标准化方案》，选用 28号长 1寸 的毫针 (直径 实验中心提供，合格证号 ：SCXK(鄂)2009—0oo6)。大鼠随机分 0．3mm，长 25mm)，从 “百会”穴和 “水沟”穴进针 ，接 LH202H型 为模型对照组、电针治疗组和正常对照组，每组3O只。 韩氏穴位神经刺激仪，连续波 ，电流强度 1ITLA，频率2Hz，留针 1．2 试剂与仪 器