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医学信息2011年6月第24卷第6期 MedicalInformation.Jun.2011.Vo1.24.No.6
份标本在进行卡式法鉴定的同时还进行了试管法的比对,现将结果 筛检和直接抗人球蛋白试验,2例直接抗人球蛋白试验阳性,5例抗
报道如下。 体筛检阳性。此 12例标本中1例血浆中有非特异性冷抗体 ,3例有
1材料 与方法 IgG型抗一E抗体,2例有 IgM型抗一M抗体,2例红细胞被抗体致敏 ,
i.1仪器 瑞士达亚美公司微柱凝胶卡式法专用离心机 (ID—Cen— 1例 自身凝集,3例有严重冷凝集。
trifuge),移液器 10p,L和 50p。 3讨论
1.2试剂 卡式凝胶技术是生物化学凝胶过滤技术和免疫学抗原抗体反应
1.2.1仪器试剂 瑞士达亚美公司的DiaclonABOD/正反定型卡,ID— 相结合的产物,通过调节凝胶的浓度来控制凝胶间隙的大小,使其间
Diluent2(2号稀释液)。 隙只能允许游离的红细胞通过,从而使游离红细胞与聚集红细胞分
1.2.2手工试剂 单克隆抗A抗B标准血清为长春博德生物技术有 离 ,通过离心,如果红细胞沉积在凝胶管底部,则表明红细胞未发生
限责任公司生产,IgM抗D为上海血液生物医药有限责任公司生产。 凝集,是阴性反应 ,若红细胞聚集在凝胶管上部,则表明红细胞发生
1.2_3试剂红细胞 1%标准A、B红细胞为上海血液生物医药有限责 凝集,呈阳性反应。此外,凝胶中已经加好了抗人球蛋白及各类血型
任公司生产 。 抗体,从而简化了操作过程,只需加入样本即可。该技术 1994年获得
1.2.4受检红细胞 取病人压积红细胞 101xL加0.5mlID—Diluent2混 美国FDA认可,经过不断的改进和大量临床应用 ,因其具有操作简
合。 单、敏感性高、特异性强、结果易判读、重复性好、安全快速等优点而
1.2.5受检血浆 病人标本 3400rpm离心 3min后所得。 作为常规的红细胞血型检测手段用于临床2[-31。
1.3标本来源 本院住院病人常规血型鉴定(ABoR/hD血型鉴定)标 达亚美公司生产的ABO/D正反定型卡,同时进行ABO血型系
本,共计 107373例。 统及Rh血型系统中抗 D的鉴定 ,并同时进行反向定型,这与 《全国
1.4标本收集与保存 所有标本的检测在标本采集的当天或隔天 临床检验操作规程》对血型鉴定的要求是一致的。
(放4℃冰箱)完成。所用的抗凝剂是EDTA—K2。 由于凝胶间隙只让未凝集的红细胞通过,这就使得卡式检测具
1.5实验设计 ①受试组:采用达亚美血型正反定型卡进行ABO/Rh 有较高的灵敏性,对于一些由于红细胞抗原减弱而造成手工试管法
血型鉴定。②对照组:采用试管法进行ABOR/hD血型正向定型及 鉴定困难的标本,卡式法的阳性度就更强。
ABO反向定型。 而在特异性方面,由于凝胶卡中加入了抗人球蛋白以促进红细
1.6方法 胞的特异性凝集,因此其特异性明显高于手工试管法。虽然试管法
1.6.1微柱凝胶卡式法按Diamed—ID卡式血型鉴定操作手册进行:取 通过正反定型相结合,对于血型鉴定能得到近乎 100%的正确率 ,但
DiaclonABOD/正反定型卡一张,标记与标本试管上相对应的编号,
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